1、目的:晚期糖化終產物(AGEs)與糖尿病骨質疏松癥有關。近年來研究發(fā)現(xiàn)AGEs能夠影響成骨細胞的骨形成和破骨細胞的骨吸收,參與骨質疏松癥的形成。本實驗觀察內質網應激在AGEs誘導MG63成骨樣細胞表達炎癥因子IL-6中的作用,進一步了解糖尿病加速骨質疏松癥形成的機制。
　　方法:①以不同濃度的AGEs(0~400μg/ml)作用于MG63細胞24h,通過MTT法檢測AGEs對細胞生長的影響。②不同濃度的AGEs(0~200μg/m

2、l)作用于MG63細胞24h后,應用ELISA法檢測AGEs對MG63細胞分泌炎癥因子IL-6的影響;部分實驗用氨基胍(AG)、?；撬嵝苊撗跄懰?TUDCA)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)及二聯(lián)苯碘(DPI)預處理1h后,再用200μg/mlAGEs刺激24h,ELISA法觀察各種抑制劑對AGEs誘導MG63細胞分泌IL-6的影響。③不同濃度的AGEs(0~200μg/ml)作用于MG63細胞24h后,Western-blot檢測A

3、GEs對IRE、JNK磷酸化及總蛋白含量,GRP78總蛋白含量表達的影響;Western-blot觀察各種抑制劑AG、TUDCA、NAC及DPI預處理1h后再用200μg/mlAGEs刺激24h對IRE、JNK磷酸化及總蛋白含量,GRP78總蛋白含量表達水平的變化情況。
　　結果:①不同濃度AGEs作用于MG63細胞24h后,MTT結果顯示50~200μg/mlAGEs作用24h對細胞的生存率無明顯變化;但是400μg/mlAGE

4、s作用于MG63細胞24h后能夠抑制細胞的生長(P<0.05)。②不同濃度AGEs作用于MG63細胞24h后,ELISA結果顯示50~200μg/mlAGEs可促進MG63細胞上調IL-6表達,200μg/mlAGEs作用最明顯(p<0.01);AG、TUDCA、NAC及DPI能明顯抑制AGEs上調炎癥因子IL-6的表達(p<0.01)。③不同濃度AGEs作用于MG63細胞24h后,Western blot結果顯示50~200μg/ml

5、AGEs可上調IRE、JNK磷酸化水平和GRP78總蛋白含量的表達,200μg/mlAGEs作用最明顯(p<0.01);AG、TUDCA、NAC及DPI均能抑制IRE、JNK磷酸化水平和GRP78總蛋白表達(P<0.01)。
　　結論:AGEs可促進MG63細胞分泌炎癥因子IL-6,其機制與激活內質網應激相關。AG、NAC及DPI能夠逆轉AGEs引起的IRE、JNK磷酸化水平和GRP78總蛋白含量的表達升高及IL-6上調,表明內質