1、目的：運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)，研究子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織蛋白質(zhì)組表達(dá)圖譜的差異，尋找和確定子宮內(nèi)膜癌差異表達(dá)蛋白質(zhì)，分析其中與子宮內(nèi)膜癌相關(guān)蛋白質(zhì)，為進(jìn)一步研究子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 方法: 1、雙向凝膠電泳分離子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織的總蛋白。 2、用ImgemMster圖像分析軟件檢測雙向電泳實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和差異表達(dá)蛋白。 3、應(yīng)用質(zhì)譜鑒定所篩查的差異表達(dá)蛋白

2、。 4、應(yīng)用RT-PCR技術(shù)對篩選出的部分差異表達(dá)蛋白在mRNA水平進(jìn)行驗(yàn)證。 結(jié)果: 1、獲得穩(wěn)定的高分辨率和重復(fù)性的子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織雙向電泳圖譜。測得子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織各3塊凝膠的平均蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)分別為1556±38和1657±31。 2、子宮內(nèi)膜癌組織與正常子宮內(nèi)膜組織相比較，經(jīng)雙向凝膠電泳軟件分析，共找到27個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其中22個(gè)蛋白質(zhì)在子宮內(nèi)膜癌組織中含量增加

3、，5個(gè)蛋白質(zhì)含量減低。 3、對差異蛋白質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，質(zhì)譜鑒定出15種與子宮內(nèi)膜癌相關(guān)的差異蛋白質(zhì)，其中13種在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)上調(diào)的蛋白質(zhì)為p48，烯醇酶，ATP合酶，膜聯(lián)蛋白，蛋白質(zhì)延長因子-α1，Unknown(protein for IMAGE：3897065)，硫氧還蛋白過氧化物酶6，加帽蛋白Cap G，焦磷酸酶1，過氧化物歧化酶突變體Q143n，蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)前體，丙酮酸激酶M1/M2，亮

4、氨酸氨基肽酶，2種在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)下調(diào)的蛋白質(zhì)為Stathmin 1，α1-抗胰蛋白酶。 4、通過RT—PCR技術(shù)在基因水平對p48，烯醇酶，ATP合酶，膜聯(lián)蛋白，蛋白質(zhì)延長因子1-α1，Stathminl這6個(gè)蛋白質(zhì)的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果與質(zhì)譜結(jié)果一致。 結(jié)論: 1、應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法篩選鑒定出15種與子宮內(nèi)膜癌癌變相關(guān)的蛋白質(zhì)，這些蛋白涉及能量代謝相關(guān)的多種酶、抗氧化相關(guān)蛋白、細(xì)胞增殖調(diào)控蛋白以及