二羥異黃酮對(duì)細(xì)胞周期的影響及與雌激素作用的比較.pdf_第1頁(yè)
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1、大豆異黃酮是大豆生長(zhǎng)過(guò)程中形成的一類次生代謝產(chǎn)物,具有多酚結(jié)構(gòu)的混合物,它們結(jié)構(gòu)與動(dòng)物雌激素相似,屬于植物雌激素,能夠與動(dòng)物雌激素受體(ER)結(jié)合,當(dāng)體內(nèi)雌激素水平較低時(shí)可以表現(xiàn)出雌激素活性;而當(dāng)異黃酮濃度較高時(shí)則表現(xiàn)為抗雌激素活性,具有雙向調(diào)節(jié)平衡功能。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模罕容^二羥異黃酮分別作用于雌激素受體陽(yáng)性和陰性的乳腺癌細(xì)胞后,細(xì)胞周期的變化及其可能機(jī)制,從而驗(yàn)證二羥異黃酮獨(dú)立于雌激素受體發(fā)揮作用的可能性。 實(shí)驗(yàn)方法:以雌

2、激素受體陽(yáng)性的MCF-7乳腺癌細(xì)胞為研究對(duì)象,采用RT-PCR方法檢測(cè)二羥異黃酮終濃度分別為0,5,10,20,40μmol/L作用24h后,細(xì)胞周期素cyclinE1、細(xì)胞周期素依賴性激酶cdk2和抑癌基因p21mRNA表達(dá)的變化,探討二羥異黃酮對(duì)雌激素受體陽(yáng)性細(xì)胞細(xì)胞周期素和抑癌基因的影響;應(yīng)用終濃度為100μmol/L的雌二醇和10μmol/L的二羥異黃酮分別作用于雌激素受體陰性的MM231細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周

3、期的變化,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,從而探討其對(duì)細(xì)胞的增殖及周期的作用,并通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察與Giemsa染色法檢測(cè)驗(yàn)證其促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與二羥異黃酮終濃度為0時(shí)的陰性對(duì)照組比較,當(dāng)二羥異黃酮終濃度為10,20,40μmol/L時(shí),cyclinE1表達(dá)水平下降(P<0.05);cdk2表達(dá)水平下降(P<0.05);p21表達(dá)水平上調(diào)(P<0.05);與陰性對(duì)照組比較,二羥異黃酮終濃度為5μmo1/L時(shí),cycli

4、nE1、cdk2和p21表達(dá)差異均不明顯(P>0.05)。 終濃度為100μmol/L的雌二醇和10μmol/L的二羥異黃酮都能使MM231細(xì)胞G2/M期阻滯,并能抑制MM231細(xì)胞生長(zhǎng),促使其凋亡,雌二醇作用效果更明顯。 結(jié)論:二羥異黃酮誘導(dǎo)雌激素受體陽(yáng)性細(xì)胞MCF-7細(xì)胞凋亡很可能是通過(guò)p21-cyclinE1/CDK2信號(hào)通路發(fā)揮作用的,并且這種誘導(dǎo)是劑量依賴性的。 雌二醇和二羥異黃酮在一定濃度情況下,也對(duì)

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