1、幽門螺桿菌(簡(jiǎn)稱Hp)是慢性胃炎的致病菌,與消化性潰瘍和胃癌的發(fā)生密切相關(guān),然而對(duì)于其傳播途徑的研究還不是很清楚。近年來(lái)提出受污染的水和食物可能作為載體傳播幽門螺桿菌,但缺乏有力證據(jù)支持,仍不清楚其在環(huán)境中的生存情況。本研究擬用燭缸法培養(yǎng)幽門螺桿菌(NCTC11637),并選出最適培養(yǎng)基;將幽門螺桿菌接種到人工模擬的四種實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中,觀察幽門螺桿菌在不同環(huán)境中的生存狀況。
　　第一部分:幽門螺桿菌培養(yǎng)方法的建立和培養(yǎng)基的比較

2、>　　目的:建立幽門螺桿菌的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)方法,并選出該實(shí)驗(yàn)條件下最優(yōu)的培養(yǎng)基。
　　方法:采用燭缸法對(duì)幽門螺桿菌進(jìn)行復(fù)蘇,對(duì)菌種進(jìn)行鑒定并保存。將相同菌量的幽門螺桿菌接種到不同培養(yǎng)基上,培養(yǎng)5天后,檢測(cè)并計(jì)算細(xì)菌數(shù)量,選出本實(shí)驗(yàn)最優(yōu)的培養(yǎng)基。并將不同稀釋度菌液接種到最優(yōu)培養(yǎng)基上,觀察其培養(yǎng)效果。
　　結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)采用燭缸法成功復(fù)蘇幽門螺桿菌,鑒定為幽門螺桿菌陽(yáng)性。四種固體培養(yǎng)基上幽門螺桿菌生長(zhǎng)情況存在差異,本實(shí)驗(yàn)最優(yōu)的培養(yǎng)基為

3、添加7％新生牛血清的布氏瓊脂,有較好的分離培養(yǎng)效果。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)室采用燭缸法成功培養(yǎng)復(fù)蘇幽門螺桿菌;在該條件下最優(yōu)的培養(yǎng)基是添加7%新生牛血清的布氏瓊脂,有較好的培養(yǎng)效果,能夠用于下一步實(shí)驗(yàn)從環(huán)境樣本中分離培養(yǎng)幽門螺桿菌。
　　第二部分:幽門螺桿菌在人工模擬環(huán)境中生存狀況的研究
　　目的:研究幽門螺桿菌在不同環(huán)境中的生存狀況。
　　方法:實(shí)驗(yàn)室模擬純水、牛奶、豬肉末和胡蘿卜四種環(huán)境樣本,將幽門螺桿菌接種到2

4、5ml(g)樣本中使菌液濃度約為106cfu/ml(g)。樣品分別放置于室溫和4℃,在不同時(shí)點(diǎn)采樣從樣品中分離培養(yǎng)幽門螺桿菌,并染色觀察其生存狀況。
　　結(jié)果:幽門螺桿菌在四種模擬的環(huán)境中均不能生長(zhǎng)繁殖,僅能存活一段時(shí)間,一段時(shí)間后無(wú)法分離。幽門螺桿菌在4℃環(huán)境中的存活時(shí)間長(zhǎng)于室溫,顯微鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)逐漸由桿狀轉(zhuǎn)變成圓球體。比較不同環(huán)境介質(zhì),幽門螺桿菌在牛奶中的存活時(shí)間最長(zhǎng),4℃超過(guò)10天,室溫超過(guò)6天。在豬肉末中的存活時(shí)間,4

5、℃中超過(guò)6天,室溫能存活3天以上。幽門螺桿菌在4℃水中存活超過(guò)5天,而2天后就不能從室溫的水中分離。在胡蘿卜樣本中的存活時(shí)間是四種環(huán)境中最短,4℃和室溫都僅能存活數(shù)小時(shí),一天后均不能從胡蘿卜樣本中分離培養(yǎng)出幽門螺桿菌。
　　結(jié)論:幽門螺桿菌在環(huán)境中不能生長(zhǎng)繁殖,僅能存活一段時(shí)間。顯微鏡下觀察幽門螺桿菌逐漸轉(zhuǎn)變成不能培養(yǎng)的圓球體。在環(huán)境溫度和菌液濃度相似的條件下,幽門螺桿菌在牛奶中生存時(shí)間較長(zhǎng),故牛奶可能是幽門螺桿菌傳播的重要媒介,