1、揚州大學碩士學位論文制備淋病奈瑟菌黏附因子受體hCD46和hCEACAM1轉(zhuǎn)基因小鼠的前期研究姓名：王勁松申請學位級別：碩士專業(yè)：動物學指導教師：孫懷昌李國才20070501揚州人學碩_|：論文術(shù)擴增出啟動子與cDNA相連的hCD46完整基因，并用其置換出pcDNA31中的CMV啟動子，構(gòu)建成重組真核表達載體pCD46。網(wǎng)時構(gòu)建了用hCD46基因啟動子指導hCEACAMlcDNA表達的重組真核表達載體pCDPCAMlGI，該載體中用兔B

2、球蛋白第二內(nèi)含子增強目的eDNA基因的表達。分別將PcD46、pCDPCAMIGI和pCD46pCDPCAMlGI轉(zhuǎn)染COS1細胞，通過G418篩選以及流式細胞儀檢測證實相應(yīng)目的基因表達之后再進行淋病奈瑟菌的黏附試驗。實驗結(jié)果表明，淋病奈瑟菌可以黏附這3種重組COS一1細胞，并且對hCD46hCEACAMl共表達COS1細胞的黏附能力最強。這些結(jié)果為hCD46和hCEACAMl轉(zhuǎn)基因小鼠可作為淋病奈瑟菌感染研究的動物模型提供了實驗依據(jù)。

3、分別將表達hCD46、hCEACAMl的基因構(gòu)件、這兩種基因構(gòu)件的等摩爾數(shù)混合物通過顯微注射法注射入小鼠受精卵中，得到hCD46轉(zhuǎn)基因FO代小鼠49只、hCEACAMl轉(zhuǎn)基因F0代小鼠22只，hCD46hCEACAMl轉(zhuǎn)基因F0代小鼠48只。經(jīng)PCR反復(fù)檢測表明，目前已得到4只llCD46基因整合陽性的轉(zhuǎn)基因小鼠，轉(zhuǎn)基因表達尚在檢測中；hCEACAMl轉(zhuǎn)基因小鼠、hCD46hCEACAMl共表達轉(zhuǎn)基因小鼠也在進一步檢測。關(guān)鍵詞：淋病奈瑟