1、目的:觀察2Hz、100Hz和2/100Hz三種不同頻率電針對(duì)擬血管性癡呆(Vascular Dementia，VD)大鼠的行為學(xué)、海馬CA1區(qū)病理形態(tài)學(xué)、p38MAPK信號(hào)通路及細(xì)胞凋亡的干預(yù)效應(yīng)，探討電針治療VD的適宜頻率及其作用機(jī)制，為針灸臨床治療VD提供科學(xué)的電針刺激參數(shù)。
　　方法:
　　用Morris水迷宮系統(tǒng)篩選出學(xué)習(xí)記憶功能正常的大鼠，將其隨機(jī)分為假手術(shù)組、待造模組。采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈反復(fù)缺血再灌注加腹腔注射硝

2、普鈉的方法制備VD模型，假手術(shù)組大鼠分離頸總動(dòng)脈，不注射硝普鈉，不阻斷血流。阻斷頸總動(dòng)脈1min后觀察大鼠的翻正反射及虹膜變化，以確保腦組織缺血。術(shù)后將存活的模型大鼠隨機(jī)分為模型組、電針2Hz組、電針100Hz組、電針2/100Hz組。于術(shù)后第3d開(kāi)始治療。電針組選取“大椎”、“百會(huì)”、“后三里”（雙）、“膈俞”（雙），0.30×25mm毫針刺入，接韓式電針儀，分別施以低頻2Hz、高頻100Hz及變頻2/100Hz刺激，10min/次，

3、1次/d，連續(xù)治療15d。假手術(shù)組和模型組均采用相同體位固定10min。于造模后1d和17d進(jìn)行卒中指數(shù)評(píng)分和神經(jīng)癥狀評(píng)分。于17d進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)。于行為學(xué)檢測(cè)結(jié)束后，斷頭處死大鼠，在冰盤(pán)上快速取腦，將左側(cè)腦組織固定于10％甲醛溶液，常規(guī)石蠟包埋、切片待測(cè)。常規(guī)HE染色，光鏡下觀察大鼠腦組織海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。將右側(cè)半球海馬加生理鹽水，制成10％的腦組織勻漿，4℃4000r/min離心20min，提取上清液，采用免疫組化法

4、檢測(cè)p38MAPK表達(dá)，WesternBlot技術(shù)檢測(cè)Bax、Bcl-2、Caspase-3表達(dá)，Tunel法檢測(cè)海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)果:
　　1不同頻率電針對(duì)VD大鼠行為學(xué)及海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)的影響
　　1.1行為學(xué)評(píng)分
　　造模后1d，電針組與模型組的卒中指數(shù)評(píng)分和神經(jīng)癥狀評(píng)分均明顯高于假手術(shù)組，各電針組、模型組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。造模后17d，電針組卒中指數(shù)評(píng)分和神經(jīng)癥狀

5、評(píng)分較模型組顯著降低（P＜0.01）。2Hz組、100Hz組、2/100Hz組兩兩比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　1.2行為學(xué)檢測(cè)
　　水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:模型組大鼠逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)，穿越虛擬平臺(tái)次數(shù)明顯減少，與假手術(shù)組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。三種頻率電針均可縮短逃避潛伏期，增加穿越虛擬平臺(tái)次數(shù)，較模型組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，各電針組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。<

6、br>　　1.3不同頻率電針對(duì)VD大鼠CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)的影響
　　模型組大量細(xì)胞明顯水腫，細(xì)胞排列疏松、紊亂，細(xì)胞脫落明顯，形狀欠規(guī)則，細(xì)胞核明顯縮小、變形，核仁呈碎片、多角形，核質(zhì)不均勻;各電針組病變較模型組均有明顯改善，細(xì)胞水腫減輕，脫落減少，排列相對(duì)緊密、整齊，細(xì)胞呈類圓形，細(xì)胞核質(zhì)清晰。
　　2不同頻率電針對(duì)VD大鼠海馬區(qū)p38MAPK、Bax、Bcl-2、Caspase-3表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響
　　

7、模型組p38MAPK陽(yáng)性表達(dá)增強(qiáng)，平均光密度值明顯增高，較假手術(shù)組有顯著差異(P＜0.01)。三種頻率電針均可降低p38MAPK陽(yáng)性表達(dá)、平均光密度值，較模型組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，各電針組之間比較無(wú)差異性(P＞0.05)。
　　模型組Bcl-2蛋白表達(dá)水平顯著降低，Bax蛋白表達(dá)水平明顯升高，較假手術(shù)組差異顯著(P＜0.01)。不同頻率電針均可升高Bcl-2蛋白表達(dá)，降低Bax蛋白表達(dá)，較模型組有顯著差異(P＜0.0

8、5或P＜0.01)。其中2Hz組、2/100Hz組降低Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)作用更顯著，與100Hz組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);2Hz組較2/100Hz組治療效應(yīng)更顯著(P＜0.05)。
　　模型組Caspase-3蛋白表達(dá)均明顯升高，較假手術(shù)組差異顯著(P＜0.01);各電針組Caspase-3蛋白表達(dá)均顯著降低，與模型組比較差異顯著(P＜0.01);其中2Hz組、2/100Hz組降低Caspase-3蛋白表達(dá)更明顯

9、，與100Hz組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);2/100Hz組較2Hz組降低Caspase-3蛋白表達(dá)更顯著(P＜0.01)。
　　模型組平均光密度值升高，較假手術(shù)組差異顯著(P＜0.01);各電針組平均光密度值降低，與模型組比較有顯著差異(P＜0.01)，但各電針組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論:2Hz、100Hz、2/100Hz頻率電針刺激“大椎”、“百會(huì)”、“后三里”、“膈俞”均可減輕腦缺血再灌注對(duì)V