1、目的：通過觀察潰瘍性結(jié)腸炎( ulcerative colitis，UC)小鼠模型在經(jīng)過骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)治療前后結(jié)腸的病理組織學(xué)改變及血清細(xì)胞因子、生物酶等檢測指標(biāo)的變化，探討潰瘍性結(jié)腸炎的免疫病理機制，研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對潰瘍性結(jié)腸炎炎癥損傷的治療修復(fù)情況，從而為利用細(xì)胞生物手段治療潰瘍性結(jié)腸炎提供實驗室依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.研究對象
　　

2、來源于增強綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)小鼠骨髓的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs);7-8周齡C57BL/6小鼠54只平均分成三組，分別為正常對照組、實驗性潰瘍性結(jié)腸炎模型組、靜注骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的潰瘍性結(jié)腸炎治療組。
　　 2.實驗方法
　　 對培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行表型測定篩選Flkl陽性的MSCs。采用三硝基苯磺酸(trinitrobenzene

3、sulfonic acid，TNBS)灌腸的方法以7-8周齡C57BL/6小鼠作為研究對象，制作潰瘍性結(jié)腸炎小鼠實驗?zāi)Ｐ?，給實驗性潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型經(jīng)尾靜脈注入培養(yǎng)的Flkl陽性的MSCs制作潰瘍性結(jié)腸炎治療模型，分別于不同的時間第1、4、8、12、18、25天處死小鼠，取三組小鼠結(jié)腸組織經(jīng)HE染色后對比觀察各自結(jié)腸組織的病理學(xué)變化；使用免疫組化的方法檢測骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在小鼠結(jié)腸的定植分布情況及其對炎癥損傷的治療修復(fù)作用；用混合淋巴

4、細(xì)胞反應(yīng)實驗檢測三組T細(xì)胞的功能變化；使用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測三組小鼠血清細(xì)胞因子的變化；使用生化分析儀檢測三組小鼠生化指標(biāo)的變化。
　　 結(jié)果：光鏡下UC小鼠結(jié)腸組織腺體排列紊亂，基底膜斷裂或消失；各種炎癥性細(xì)胞浸潤；隱窩膿腫形成；粘膜下水腫及纖維化。經(jīng)尾靜脈輸注EGFP小鼠的MSCs到實驗性潰瘍性結(jié)腸炎模型小鼠體內(nèi)后，小鼠的結(jié)腸組織炎癥損傷明顯減輕，炎癥細(xì)胞浸潤減少，可以檢測到MSCs在模型組小鼠結(jié)腸的定植并分化為腸上皮細(xì)胞

5、，對結(jié)腸的炎癥損傷有明顯的修復(fù)作用。UC小鼠T細(xì)胞活性明顯高于對照組與MSCs治療組，血清細(xì)胞因子IL-iβ、IL-6、TNF-a水平上升，IL-10水平下降。MPO、NOS活性升高，NO含量升高，SOD活性降低。經(jīng)MSCs治療后血清細(xì)胞因子及生物酶學(xué)指標(biāo)均有所改善。
　　 結(jié)論：潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機理可能為抗原的刺激致免疫調(diào)節(jié)紊亂，表現(xiàn)為免疫炎癥反應(yīng)的過度亢進(jìn)和難于自限。T細(xì)胞免疫功能異常，血清細(xì)胞因子IL-iβ、IL-6、TN