1、自身免疫性肝病(autoimmune liver disease,ALID)是自身免疫異常引起的肝臟疾病,但其病因和發(fā)病機制尚不完全清楚。臨床常見的主要有3種類型:自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliarycirrhosis,PBC)和原發(fā)性硬化性膽管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)。臨床上,常常發(fā)現(xiàn)某種自身免疫性肝病同

2、時具有或隨后表現(xiàn)出其他種類的自身免疫性肝病的特征,臨床上稱其為自身免疫性肝病重疊綜合征。由于發(fā)病率越來越高以及疾病病因未明、臨床表現(xiàn)出的多樣性、診斷標(biāo)準(zhǔn)及治療終點等諸多方面均有待于進一步探討與明確,因此,對加強本組疾病的探索具有重要的意義。自身免疫性肝病的發(fā)病機制尚未完全闡明,目前研究結(jié)果顯示是由免疫介導(dǎo)、多種因素參與的復(fù)雜過程。通過前人不斷的研究,最近發(fā)現(xiàn)增殖誘導(dǎo)配體(APRIL)和B淋巴細(xì)胞刺激因子(BAFF)在其中發(fā)揮了重要作用,

3、二者已成為國內(nèi)外學(xué)者研究的熱門課題。自身免疫性肝炎是一種漸進性炎癥性肝臟疾病伴有高丙種球蛋白血癥和肝相關(guān)性自身抗體。病人肝臟重要的組織學(xué)發(fā)現(xiàn)是單核細(xì)胞浸潤,即CD8+T細(xì)胞。因此,公認(rèn)的自身免疫性肝炎發(fā)病機制的假說認(rèn)為環(huán)境因素觸發(fā)了T細(xì)胞介導(dǎo)的對肝臟自身抗原的瀑布樣級聯(lián)反應(yīng),導(dǎo)致了肝臟漸進的壞死性炎癥和纖維化進程。血清細(xì)胞活性因子通過免疫失調(diào)介入了自身免疫性肝炎的發(fā)病機制。屬于腫瘤壞死因子家族的活化的B細(xì)胞刺激因子是腫瘤壞死因子超家族的

4、一員,它對B細(xì)胞的存活和分化起重要作用。B細(xì)胞刺激因子由以下幾種細(xì)胞產(chǎn)生,包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞。增殖誘導(dǎo)配體是一種新確定的腫瘤壞死因子配體家族成員,由250個氨基酸殘基組成的Ⅱ型膜蛋白。起初,報道增殖誘導(dǎo)配體對腫瘤的生長具有調(diào)節(jié)作用。增殖誘導(dǎo)配體和新近報道的B細(xì)胞刺激因子具有相似的序列。增殖誘導(dǎo)配體和B細(xì)胞刺激因子的3個受體中的2個可以結(jié)合,即B cell maturation antigen(BC

5、MA)and transmembraneactivator and cyclophilin ligand interactor(TACI),配體受體結(jié)合后具有調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖的作用。從以上可知,APRIL和BAFF作為新確認(rèn)的腫瘤壞死因子配體超家族成員對促進B細(xì)胞分化、增殖和未成熟的B淋巴細(xì)胞亞型存活起著作用。
　　本研究初步檢測Ⅰ型自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis typeⅠ,AIH-1)、慢性乙型肝炎(c

6、hronic B hepatitis,HBV)、健康志愿者(healthy controls)外周血中增殖誘導(dǎo)配體(a proliferation-inducing ligand,APRIL)和B淋巴細(xì)胞刺激因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)mRNA的表達水平,同時檢測Ⅰ型自身免疫性肝炎患者生化學(xué)指標(biāo)、免疫學(xué)指標(biāo)、肝活檢病理炎癥與纖維化分級,研究Ⅰ型

7、自身免疫性肝炎患者外周血單個核細(xì)胞(PBMC)中APRIL和BAFF的表達水平與AIH-1發(fā)病機制、疾病活動度、預(yù)后之間的關(guān)系。
　　材料與方法：1.提取標(biāo)本中的總RNA并進行逆轉(zhuǎn)錄酶PCR,應(yīng)用半定量PCR法檢測37例Ⅰ型AIH確診病人(男3例,女34例,平均年齡49.97歲)、19例慢性乙型肝炎患者(男2例,女17例,平均年齡46.21歲)、15例健康志愿者(男2例,女13例,平均年齡39.47歲)的外周血APRIL和BAFF

8、 mRNA的表達含量,內(nèi)參為GAPDH。2.用特種蛋白儀檢測AIH-1外周血中IgG、IgM、IgA、CRP、C3、C4、ESR水平。3.Automatic Analyzer檢測ALT、AST、GGT、ALP、GLo水平。4.間接免疫熒光法檢測抗核抗體(ANA)、抗平滑肌抗體(ASMA)滴度。5.采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析APRIL和BAFF mRNA在三組中的表達差異是否具有統(tǒng)計學(xué)意義及其與臨床特點之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果

9、：1.APRIL、BAFF mRNA在Ⅰ型AIH中的表達水平為APPIL mRNA(0.66±0.41)、BAFF mRNA(0.76±0.35),慢性乙肝對照組為APRIL mRNA(0.33±0.26)、BAFF mRNA(0.33±0.26),健康對照組為APRIL mRNA(0.30±0.25)、BAFF mRNA(0.23±0.19),實驗組均值水平較兩個對照組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.01)。APPIL、BAFF mRN

10、A在兩對照組中的表達無顯著差異(P＞0.05)。2.APRIL、BAFF mRNA在AIH-1、慢性乙肝對照組、健康對照組中均呈中等強度的正相關(guān),以上結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(r=0.418、0.458、0.505,P＜0.05)。3.實驗組Ⅰ型AIH患者外周血中APRIL mRNA的表達水平與年齡、性別無關(guān),疾病初發(fā)組為0.65±0.39,疾病復(fù)發(fā)組為1.00±0.21,治療后緩解組為0.24±0.10,前兩組與后一組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P

11、均＜0.01),而APRIL mRNA在疾病初發(fā)組和疾病復(fù)發(fā)組的表達無顯著差異(P＞0.05)。4.BAFF mRNA表達水平在實驗組Ⅰ型AIH患者分別為疾病初發(fā)組0.76±0.36、治療后緩解組0.68±0.25、疾病復(fù)發(fā)組為0.87±0.41,三個疾病分組中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均＞0.05)。5.APRIL、BAFF mRNA表達水平與疾病活動度(生化指標(biāo)、免疫學(xué)指標(biāo)、炎癥分級及纖維化)指標(biāo)之間無明顯相關(guān)性(P均＞0.05),但BA

12、FF mRNA表達水平與IgA水平成中度程度正相關(guān)(P＜0.05)。
　　結(jié)論：1.Ⅰ型AIH患者的APRIL、BAFF mRNA的表達含量較健康者顯著升高。2.APRIL、BAFF mRNA的表達水平中等程度相關(guān)。3.Ⅰ型AIH患者初發(fā)組和疾病復(fù)發(fā)組患者APRIL mRNA有更高表達水平,治療后緩解者明顯降低。4.APRIL、BAFF與AIH-1的肝臟損害和疾病發(fā)展有關(guān)。血清APRIL、BAFF水平升高的病人可能作為基因靶向治療