1、　　本文對腫瘤化療中多藥耐藥相關基因ERGIC-53和hTNF-α逆轉(zhuǎn)耐藥進行了研究。文章利用cDNAarray等技術篩選出幾個可能的耐藥相關新基因，運用RNA干擾等技術研究其中的ERGIC-53基因在腫瘤耐藥細胞系中的表達及可能參與的耐藥機制，并檢測它在血液病臨床病例中的表達，為臨床耐藥腫瘤診斷及治療提供新靶點；克隆表達了hTNF-α并研究了它對耐藥腫瘤細胞的逆轉(zhuǎn)作用。研究中采用RNA干擾技術，設計合成了ERGIC-53基因的兩對寡核

2、苷酸模板，應用體外轉(zhuǎn)錄方法，經(jīng)轉(zhuǎn)錄、雜交、純化步驟得到較高產(chǎn)量的siRNA，轉(zhuǎn)染K562/A02細胞后，通過RT-PCR技術觀察到ERGIC-53基因mRNA水平顯著下降，在48hr時基本被抑制。本研究從經(jīng)PMA誘導的HL60細胞中成功克隆了hTNF-α基因，并在原核表達系統(tǒng)內(nèi)獲得了高效、穩(wěn)定表達。表達產(chǎn)物經(jīng)抗E-tag親和層析純化，獲得高純度高活性的TNF-α融合蛋白，為研究TNF-α的抗腫瘤作用和下一步制備針對TNF-α單克隆抗體，