爬山虎葉斑病病原菌的分離、鑒定及生物學(xué)特性分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、爬山虎葉斑病是爬山虎中為害較為嚴(yán)重的病害之一,其病害不僅嚴(yán)重影響了爬山虎的生長,也影響城市園林垂直綠化和交通通道護坡的經(jīng)濟價值。本論文對采集自河南省洛陽市欒川縣龍峪灣爬山虎葉斑病葉,進行常規(guī)組織分離純化,結(jié)合形態(tài)學(xué)和 PCR分子鑒定,鑒定出引起該種病害的病原菌,為進一步認(rèn)識該病害,以及該病害預(yù)防及綜合治理提供更多的理論依據(jù)。主要結(jié)論如下:
  通過對該病危害癥狀觀察,該病主要為害爬山虎的葉片,初期發(fā)病時有褐色的小點,然后逐漸擴大為

2、圓形、近圓形或不規(guī)則形的黃褐色病斑,邊緣組織有明顯的深褐色凸起,病斑中央散生分生孢子盤的黑色小點,發(fā)病后期病斑連接成一片,病斑中央易穿孔,嚴(yán)重時造成大量落葉。高溫高濕的環(huán)境下易發(fā)病。通過柯赫氏法則進行分離純化,并對病原菌培養(yǎng)菌落形狀及在光學(xué)顯微鏡下對分生孢子梗和分生孢子形態(tài)進行觀察。病菌分生孢子紡錘形,頂細(xì)胞生2~4根不分枝的無色附屬絲,中間有2~3個淡褐色的細(xì)胞,具有3~4個隔膜,基細(xì)胞偏生或中間生一根無色的附屬絲。初步鑒定出該病原菌

3、為數(shù)絲頂多毛孢(Bartalinia robillardoides Tassi)。進一步通過 PCR對 rDNA-ITS區(qū)段(ITS1、ITS2)擴增、測序,在GenBank中進行Blast搜索和比對分析。根據(jù)rDNA-ITS序列分析結(jié)果確定所分離的病原菌為半知菌中的數(shù)絲頂多毛孢。為進一步驗證其致病性,我們對該病原菌進行了反接驗證,發(fā)現(xiàn)接種所分離的數(shù)絲頂多毛孢可導(dǎo)致與接種病原菌一致的發(fā)病癥狀,進一步驗證了我們所分離的病原菌為B. rob

4、illardoides。這是首次明確報道數(shù)絲頂多毛孢可引起植物葉部病害。
  對數(shù)絲頂多毛孢的生物學(xué)特性進行了初步研究。測定了在不同溫度、不同pH值、不同光照、不同碳氮源的條件下對數(shù)絲頂多毛孢生長和產(chǎn)孢量的影響,為爬山虎病原菌研究提供理論依據(jù)。結(jié)果顯示,溫度會促進病原菌的生長,其能正常生長的溫度范圍為15~35℃,而在25℃條件下生長最旺盛、產(chǎn)孢量最大,菌絲以及分生孢子的致死溫度為60℃,10 min。病菌在 pH值為4~11范圍

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