MMPs介導的rhTNF-α融合蛋白的表達及其生物信息學預測.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]
　　 通過融合蛋白技術，將腫瘤組織高表達的基質金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMPs)的底物序列作為融合肽段，與hTNF-α構建成為具有靶向性的重組hTNF-α融合蛋白，并將其純化，利用生物信息學手段對其結構和理化性質做出預測和分析。
　　 [方法]
　　 把本課題組先前構建的融合蛋白質粒轉化到大腸桿菌表達菌Rosette2中，分別表達、純化出四種帶有GST標簽的fold

2、on-MMPs-hTNF-α，經(jīng)Western Blot鑒定，再用凝血因子(Factor Xa)切除載體GST標簽；利用非變性凝膠電泳檢測去標簽后各蛋白在體外形成三聚體的情況；分別用基質金屬蛋白酶MMP-1、MMP-8、MMP-2和MMP-9酶切相應的融合蛋白；最后利用Chromas2、Antheprot、Cn3D等軟件，對其結構和理化性質進行預測和分析。
　　 [結果]
　　 經(jīng)誘導得到可溶性融合蛋白，成功切除GST標

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