在體外成熟過(guò)程中豬卵丘細(xì)胞影響卵母細(xì)胞質(zhì)量的機(jī)理.pdf_第1頁(yè)
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1、本實(shí)驗(yàn)以屠宰場(chǎng)豬卵巢為試驗(yàn)材料,研究了不同培養(yǎng)條件下卵丘細(xì)胞(CumulusCells,CCs)對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟發(fā)育的影響。 成熟發(fā)育結(jié)果表明:卵丘細(xì)胞(CumulusCells,CCs)可以提高卵母細(xì)胞孤雌激活后的發(fā)育潛力。周?chē)鷽](méi)有卵丘細(xì)胞包被的卵母細(xì)胞(DenudedOocytes,DOs)經(jīng)成熟培養(yǎng)和孤雌激活后,囊胚率明顯低于來(lái)自同類(lèi)卵泡的卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(Cumulus-OocyteComplex,COCs)。而當(dāng)

2、DOs與分離的CCs(D+CCs)或者COCs(coDOs)共培養(yǎng)44h后,則會(huì)部分恢復(fù)發(fā)育潛力(p<0.01)。此外,在44h的IVM結(jié)束時(shí),DOs組的成熟率明顯低于COCs組(p<0.01),D+CCs組的成熟率可以部分增高,coDOs組的成熟率則可以提高到與COCs組相同的水平。進(jìn)行GSH測(cè)定發(fā)現(xiàn):經(jīng)過(guò)與CCs或者COCs共培養(yǎng)后,單個(gè)存活卵子內(nèi)的GSH含量與COCs組無(wú)差異,說(shuō)明通過(guò)與兩種不同類(lèi)型的卵丘細(xì)胞共培養(yǎng)后,可以使卵母細(xì)

3、胞完全的達(dá)到胞質(zhì)成熟。 IVM過(guò)程中,向介質(zhì)中加入不同濃度的半胱氨酸(Cysteine,Cys)時(shí)發(fā)現(xiàn):在無(wú)Cys的介質(zhì)中DOs、D+CCs、coDOs組的成熟率無(wú)差異,均顯著低于COCs組(p<0.05),而加入一定量Cys后,除DOs組外,其他三個(gè)處理組的成熟率明顯升高(p<0.05)。進(jìn)行GSH測(cè)定發(fā)現(xiàn):向介質(zhì)中添加一定量Cys對(duì)于D+CCs組單個(gè)存活卵子內(nèi)的GSH含量無(wú)影響(p>0.05),而對(duì)coDOs組的單個(gè)存活卵子

4、內(nèi)GSH含量則有顯著提高(p<0.05)。 進(jìn)行TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn):在正常培養(yǎng)條件下,無(wú)論DOs組還是COCs組均不會(huì)發(fā)生凋亡。而在含有活性氧簇的介質(zhì)中培養(yǎng)44h后,DOs組卵母細(xì)胞在沒(méi)有任何保護(hù)機(jī)制下,凋亡程度極其嚴(yán)重,COCs組凋亡程度則輕的多,但是卵丘細(xì)胞凋亡不管在數(shù)量上還是程度上都很?chē)?yán)重。當(dāng)加入了抗氧化類(lèi)藥物之后,DOs組卵母細(xì)胞凋亡程度明顯降低,而COCs組卵母細(xì)胞凋亡程度增加,卵丘細(xì)胞的凋亡程度和數(shù)量均有所

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