1、研究背景：
　　 創(chuàng)傷性骨髓炎與骨缺損是當(dāng)今臨床骨科難以治療的兩大疾病，骨髓炎尤其是慢性骨髓炎由于病變深在、易復(fù)發(fā)等原因使治療非常棘手。而創(chuàng)傷性大面積骨缺損又由于缺乏合適的骨替代物，存在感染風(fēng)險等原因亦難于治療。近年來由于納米材料技術(shù)的發(fā)展使人們看到了使用載藥納米復(fù)合骨治愈骨缺損與骨髓炎的希望。本次研究首先通過查閱相關(guān)文獻對載藥納米材料治療骨缺損與骨髓炎的研究現(xiàn)狀進行較為全面、具體的分析。對載藥納米材料的設(shè)計與制各方法，骨缺損與

2、骨髓炎動物模型的制作以及此項研究的大體步驟、檢測指標(biāo)與效果評價進行了總結(jié)，為后續(xù)研究提供了良好的理論支持與實驗參考。大量閱讀相關(guān)文獻后發(fā)現(xiàn)，許多研究者使用納米級材料制作仿生骨，并通過不同方法在其中加入藥物，以期同時治療感染并修復(fù)骨缺損，但研究總體還處于實驗室階段，且缺乏相關(guān)動物模型的制作標(biāo)準(zhǔn)，在藥物緩釋及仿生骨制備方法上還需進一步改良。載藥納米復(fù)合骨在多項治療動物骨髓炎與骨缺損的研究中大都取得了其極好的效果，作為一種新興的骨替代材料有著

3、廣闊的發(fā)展前景。
　　 目的：
　　 本次研究考慮到臨床對人工骨持續(xù)抗菌性及組織相容性的要求，依靠殼聚糖包封硫酸依替米星，并與納米級羥基磷灰石復(fù)合制成一種新型緩釋載藥納米骨支架，以期為臨床治療骨缺損、骨髓炎提供一定幫助。
　　 通過離子凝膠法制作載硫酸依替米星的殼聚糖顆粒，并討論了殼聚糖、三聚磷酸鈉濃度與所成顆粒質(zhì)量及產(chǎn)率的關(guān)系。選用新型半合成氨基糖苷類抗生素依替米星作為包封藥物，不僅利用了其強效抗菌性，且依替米

4、星為水溶性藥物包封操作較簡便。原料采用納米級羥基磷灰石保證了材料的高組織相容性和吸收活性。對羥基磷灰石的加入量及支架干燥方法的討論，使最終制得的骨支架具有盡可能優(yōu)秀的理化活性。
　　 材料和方法：
　　 離子凝膠法制作載硫酸依替米星的殼聚糖顆粒，并結(jié)合納米級羥基磷灰石采用凍干成孔法制備新型載藥納米骨支架。對支架進行電鏡觀察、X線多晶衍射、總孔隙率測定以了解其表征，進行抑菌試驗及釋藥實驗了解骨支架抗菌性及緩釋性，最后采用骨

5、髓間充質(zhì)干細胞檢測支架的組織相容性及誘導(dǎo)活性。
　　 結(jié)果：
　　 對采用凍干成孔法制備的新型載藥納米骨支架進行性質(zhì)檢測。電鏡觀察見支架具有納米級球棒狀微觀結(jié)構(gòu)，材料孔隙分布良好，總孔隙率為70.68％；支架進行X線多晶衍射為典型羥基磷灰石波形，載藥殼聚糖顆粒未能出峰。
　　 以標(biāo)準(zhǔn)金黃色葡萄球菌為實驗菌，以空白骨支架及純殼聚糖支架為對照，觀察載藥納米骨支架的持續(xù)抗菌活性，一周后仍可見明顯抑菌圈。長期釋藥實驗，一

6、周后仍有藥物釋出且在有效抑菌濃度之上。累計釋放實驗效果更為優(yōu)秀且皆在安全劑量范圍內(nèi)。納米骨支架載藥量及包封率可以滿足臨床抗感染需要。
　　 原位培養(yǎng)法分離培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細胞，9d后傳代細胞鋪滿瓶底，形成明顯克隆，胞體狹長，核呈卵圓形，形態(tài)趨于一致，為成纖維細胞樣漩渦狀排列。遂與載藥納米骨支架進行共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)細胞對支架呈趨向性生長，黏附牢固，無細胞活性抑制，僅見少量細胞生理性死亡，支架組織性容性佳，幾無細胞毒性。共培養(yǎng)7d后骨