1、目的：模擬出生窒息，建立新生大鼠窒息模型，研究新生大鼠窒息模型的可行性，并觀察七氟烷預(yù)處理對(duì)窒息新生大鼠海馬 CA1區(qū)神經(jīng)元自噬和遠(yuǎn)期認(rèn)知功能的影響，探討七氟烷預(yù)處理可能的腦保護(hù)作用和機(jī)制。
　　方法：1、參考Grojean和余加林等人的方法，將7日齡（P7）的SD大鼠持續(xù)呼吸100％氮?dú)?0min，建立新生大鼠窒息模型，并通過(guò)神經(jīng)行為學(xué)觀察、動(dòng)脈血?dú)夥治?、短期神?jīng)功能評(píng)價(jià)、腦水腫的測(cè)定以及光鏡下的形態(tài)學(xué)鑒定。
　　2、將2

2、82只7日齡大鼠隨機(jī)分成對(duì)照組（C組），缺氧組（H組），七氟烷預(yù)處理組（S組），采用免疫組化、western blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3的變化；HE染色和DAPI染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的病理變化；P21行懸吊實(shí)驗(yàn)，P23行平衡木實(shí)驗(yàn)，P28—P33行水迷宮實(shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果：1、7日齡大鼠持續(xù)呼吸100%氮?dú)?0min作為造模缺氧時(shí)間，缺氧過(guò)程中大鼠皮膚紫紺，異常煩躁、肢體抽動(dòng)、昏迷，二便失禁等異常的神經(jīng)行為學(xué)表現(xiàn)。大鼠隨缺

3、氧時(shí)間延長(zhǎng) SPO2下降，酸中毒，動(dòng)脈血氧分壓降低和二氧化碳分壓升高。與正常組相比，模型組腦含水量升高（P<0.05）。與正常組相比，模型組完成趨地反射和懸崖逃避反射時(shí)間較長(zhǎng)（P<0.05）。蘇木精素-伊紅染色顯示模型組大鼠皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元嚴(yán)重?fù)p傷。
　　2、HE染色顯示C組海馬CA1區(qū)形態(tài)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常；H組海馬CA1區(qū)結(jié)構(gòu)明顯異常，細(xì)胞排列紊亂，成片神經(jīng)元細(xì)胞核固縮；S組海馬CA1區(qū)異常程度較H組輕。DAPI染色顯示三組大鼠海

4、馬CA1區(qū)神經(jīng)元的細(xì)胞核形態(tài)改變的數(shù)量差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與C組比較，H組和S組CA1區(qū)發(fā)生細(xì)胞核形態(tài)改變的細(xì)胞數(shù)量明顯增多（P<0.05）；S組CA1區(qū)發(fā)生細(xì)胞核形態(tài)改變的細(xì)胞數(shù)量較H組少（P<0.05）。
　　海馬CA1區(qū)LC3-Ⅱ免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果：LC3-Ⅱ表達(dá)定位于神經(jīng)元的胞漿，C組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)基本無(wú)陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞；七氟烷預(yù)處理1h，30min后有少量陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)（P<0.05）；與C組比較，H組和S組從缺氧后6h可見(jiàn)較多

5、LC3-Ⅱ陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)，12h表達(dá)明顯增多，顏色變深，24h到達(dá)高峰，后逐漸下降，顏色變淺；S組缺氧后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)LC3-Ⅱ陽(yáng)性表達(dá)較H組少（P<0.05）。
　　LC3的western blot蛋白半定量結(jié)果：C組LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值在各時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯變化；七氟烷預(yù)處理1h，30min后，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高（P<0.05）；與C組比較，H組和S組缺氧后6h LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高，24h LC3-Ⅱ/

6、LC3-Ⅰ的比值達(dá)到最大值，后逐漸減小。與H組相比，S組缺氧后各時(shí)間點(diǎn)LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值較低（P<0.05）。
　　懸吊實(shí)驗(yàn)和平衡木實(shí)驗(yàn)，三組大鼠間的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。水迷宮實(shí)驗(yàn)定向航行中，與C組相比，H組和S組平均逃逸潛伏期時(shí)間明顯延長(zhǎng)（P<0.05），與H組相比，S組第三天至第五天平均逃逸潛伏期時(shí)間較短（P<0.05）；與C相比，H組和S組穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少（P<0.05）；與H組相比，S組穿越平臺(tái)次數(shù)增多（P<