1、喜炎平注射液由穿心蓮內酯磺化物加工制成，為江西青峰藥業(yè)有限公司獨家品種，具有清熱解毒，止咳止痢之功效。臨床用于支氣管炎、扁桃體炎、細菌性痢疾等。17-氫-9-去氫穿心蓮內酯和17-氫-9-去氫穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉是喜炎平注射液的主要活性成分，在喜炎平注射液中的含量均為0.8mg/mL左右。體外實驗顯示17-氫-9-去氫穿心蓮內酯和17-氫-9-去氫穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉有抗菌、抗病毒、抗炎活性。近年來，國內外研究喜炎平注射液的

2、文獻較多，但有關喜炎平注射液以及其有效成分的藥代動力學方面的研究目前尚無報道。
　　目的:分別建立測定大鼠生物樣品中17-氫-9-去氫穿心蓮內酯和17-氫-9-去氫穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉濃度的液相色譜—質譜聯(lián)用法。運用該方法研究靜脈注射喜炎平注射液中有效成分17-氫-9-去氫穿心蓮內酯單體注射液和17-氫-9-去氫穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉單體注射液后的藥代動力學和組織分布規(guī)律，為臨床合理用藥和新藥開發(fā)提供理論依據(jù)。
　

3、　方法:測定生物樣品中17-氫-9-去氫穿心蓮內酯的濃度，采用己烯雌酚為內標，樣品前處理選用甲醇有機溶劑直接沉淀法，用在線過濾器和ZorbaxSB-C18(2.1×150mm I.D.，1.8μm粒徑)進行色譜分離，以水相（含5mmol乙酸銨）和有機相（乙腈）為流動相，采用梯度洗脫法，15％有機相(0min)→15-80％有機相(3.5min)→80-15％有機相(0.1min)→15％有機相(1.4min)。流速:0.4mL/min，

4、進樣體積:5μ L。質譜檢測系統(tǒng)采用ESI源（電噴霧化離子源），通過負離子檢測方式，在MRM（多重反應監(jiān)測）模式下，17-氫-9-去氫穿心蓮內酯和己烯雌酚的定量離子對分別為m/z349.1→m/z286.9和m/z267.1→m/z236.9。
　　測定生物樣品中17-氫-9-去氫穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉的濃度，采用亞硫酸氫鈉穿心蓮內酯為內標，樣品前處理選用甲醇有機溶劑直接沉淀法，用在線過濾器和沃特世ACQUITY UPLCTM

5、 BEH-C18(2.1×150mm，1.7μm)進行色譜分離，以水相（含5mmol乙酸銨）和有機相（乙腈）為流動相，采用梯度洗脫法，1％有機相(0 min)→1％有機相(2.0 min)→1-70％有機相(1.0 min)→70％有機相(3.0min)。流速:0.4mL/min，進樣體積:5μL。質譜檢測系統(tǒng)采用ESI源（電噴霧化離子源），通過負離子檢測方式，在MRM（多重反應監(jiān)測）模式下，17-氫-9-去氫穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉

6、和亞硫酸氫鈉穿心蓮內酯的定量離子對分別為m/z428.9→m/z96.0和m/z413.0→m/z79.9。
　　取大鼠血漿或組織勻漿，加入一定體積的甲醇和內標溶液，旋渦混勻后離心，吸取上清液，過濾后進樣。選用SD大鼠經尾靜脈注射給藥后于不同時間點眼眶取血，且采集大鼠的各臟器組織，應用本研究建立的分析方法測定血藥濃度和各臟器組織中藥物濃度，并計算相關藥代動力學參數(shù)，探討該藥在體內的代謝規(guī)律。同時比較各組織中藥物濃度，探討該藥注射給

7、藥后在大鼠體內的分布情況。
　　結果:在上述方法下，生物樣品中被測藥物的峰形良好。17-氫-9-去氫穿心蓮內酯的最低檢測限為0.1 ng/mL，最低定量限為0.5ng/mL。線性范圍為0.5-300ng/mL，R2均大于等于0.9974，日內、日間精密度RSD均小于7％，準確度在80-115％之間，回收率在80-110％之間。大鼠尾靜脈注射(5mg/kg)17-氫-9-去氫穿心蓮內酯單體注射液，將測得的血漿樣品數(shù)據(jù)用Das3.0進

8、行處理，得到藥代動力學參數(shù)，Cmax:765.8±40.5ng/mL，Tmax:5.8±2.0min，t1/2α:7.1±2.5min，t1/2β:27.5±15.1min, AUC0-t:942.3±476.6ng·h/mL, AUC0-∞:1018.2±484.7ng·h/mL。組織分布迅速而廣泛，給藥5min后，藥物濃度以腎臟中最高，其次是心、肝、肺、大腸、脾、胃。大腸在每個時間點都有一定濃度的分布。
　　17-氫-9-去氫

9、穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉的最低檢測限為0.1ng/mL，最低定量限為0.5ng/mL。線性范圍為0.5-1000ng/mL，R2均大于等于0.9840，日內、日間精密度RSD均小于5％，準確度在78-100％之間，回收率在80-105％之間。大鼠尾靜脈注射(5mg/kg)17-氫-9-去氫穿心蓮內酯-19-硫酸酯鈉單體注射液，將測得的血漿樣品數(shù)據(jù)用Das3.0進行處理，得到藥代動力學參數(shù)，Cmax:5019.2±1046.9ng/mL

10、, Tma）:5.0±1.0min, t1/2α:6.0±2.5min,t1/2β:18.1±9.4min,AUC0-t:4669.4±1968.6ng·h/mL，AUC0-∞:5300.8±1772.7ng·h/mL。組織分布迅速而廣泛，給藥5min后，藥物濃度以腎臟中最高，其次是大腸、肝、肺、心、脾、胃。腎、大腸在每個時間點都有一定濃度的分布。
　　結論:本研究分別建立了測定大鼠血漿和組織器官中17-氫-9-去氫穿心蓮內酯和1