白色念珠菌生物被膜體外模型的建立及分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分
   目的:建立白色念珠菌(Candida albicans)生物被膜(Biofilm,BF)體外模型,運(yùn)用多種形態(tài)學(xué)方法檢測,初步探討白色念珠菌BF相關(guān)感染發(fā)生機(jī)制。
   方法:體外建立2、8、24,48及72 h時間組白色念珠菌。BF模型,通過銀染、熒光探針FITC-conA和SYTO9/PI標(biāo)記等不同途徑,結(jié)合熒光顯微鏡、掃描電鏡(scanning electron microscope,SEM),激光

2、共聚焦顯微鏡(Confocal Laser Scanning Microscopy,CLSM)觀察不同時期白色念珠菌BF形成情況。
   結(jié)果:白色念珠菌能夠在玻片上形成典型的BF,通過熒光顯微鏡,SEM和CLSM完成對白色念珠菌BF形成過程動態(tài)觀察,白色念珠菌隨著時間增加逐漸增加,48 h形成初步生物被膜,72 h結(jié)構(gòu)更加復(fù)雜和成熟。
   結(jié)論:平板法能夠較好地建立白色念珠菌BF體外模型,并可利用多種方式檢測。

3、>   第二部分
   目的:應(yīng)用ISA軟件及Image-Pro Plus6.0軟件定量化分析白色念珠菌BF形成發(fā)展過程中變化,為進(jìn)一步深研究其耐藥機(jī)制及干預(yù)提供基礎(chǔ)。
   方法:將結(jié)合熒光探針SYTO9/PI標(biāo)記的CLSM圖片分別導(dǎo)入ISA軟件及Image-Pro Plus6.0軟件分析獲得白色念珠菌BF相關(guān)結(jié)構(gòu)參數(shù)定量化數(shù)據(jù)。
   結(jié)果:①ISA軟件定量化分析顯示,SYTO9/PI熒光探針標(biāo)記的生物被膜

4、模型的區(qū)域孔徑(AP)在24,48和72 h分別為0.95±0.06,0.894±0.01和0.83±0.01,平均擴(kuò)散距離(ADD)分別為1.16±0.13,1.26±0.06和2.43±0.76,結(jié)構(gòu)熵(TE)分別為4.87±0.34,5.18±0.35和5.474±0.16,兩兩比較,差異均有顯著性(P<0.05)。②Image-Pro Plus6.0軟件分析顯示,生物被膜內(nèi)真菌死亡率分別為(34.71±2.72)%,(36.63

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