中草藥F對(duì)番茄枯萎病的抗菌活性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本文以番茄枯萎病菌為供試菌種,以中草藥F為研究對(duì)象,通過(guò)液—液分配、柱層析等方法從中草藥F中分離得到主要抑菌活性成分2006-HS,主要研究結(jié)果如下: 1.以95%乙醇為提取溶劑,采用冷浸法提取。離體實(shí)驗(yàn)表明粗提物對(duì)番茄枯萎病菌具有較強(qiáng)活性。粗提物對(duì)番茄枯萎病菌3d和4d的毒力回歸方程分別為y3=0.8516x+3.8502(r=0.9697)和y4=0.7103x+4.0667(r=0.9557),計(jì)算出3d和4d的EC50分

2、別為0.224g/L和0.206g/L。 2.石油醚/70%乙醇(V:V=1:3)對(duì)粗提物進(jìn)行液—液分配分離,石油醚去除了部分色素和雜質(zhì),水相將粗提物中極性大的物質(zhì)分離出來(lái),所得的油狀物中活性物質(zhì)含量提高,對(duì)番茄枯萎病菌的抑制作用增強(qiáng)。油狀物相對(duì)番茄枯萎病菌離體試驗(yàn)3d和4d的毒力回歸方程為y3=1.0274x+3.7194(r=0.9766)和y4=1.0082x+3.7751(r=0.9879),對(duì)番茄枯萎病菌的3d和4d的

3、EC50分別為0.176g/L和0.164g/L,與粗提物相比,3d的EC50值下降了21.4%,4d的EC50值下降了20.3%,抑菌活性顯著提高。 3.采用硅膠柱,洗脫液為石油醚和乙酸乙酯,兩次柱層析,得到了晶體。二次柱層析后的晶體對(duì)番茄枯萎病菌3d和4d的毒力回歸方程為y3=0.8843x+4.5025(r=0.9481)和y4=0.9357x+4.3982(r=0.9647);5d毒力回歸方程為y5=0.9651x+4.

4、3309(r=0.9612)。晶體對(duì)番茄枯萎病菌的3d、4d和5d的EC50分別為0.037g/L、0.044g/L和0.049g/L,隨時(shí)間的延長(zhǎng),活性有所下降,EC50值略有增大。與粗提物相比,3d的EC50值下降了79.0%,4d的EC50值下降了73.2%。 4.晶體物質(zhì)經(jīng)高效薄層板“П”形二維三次平面展開(kāi),在365nm紫外燈下快速觀察,始終出現(xiàn)一個(gè)斑點(diǎn),定名為2006-HS。晶體物質(zhì)在高效液相色譜檢測(cè)圖譜中,只出現(xiàn)了單

5、一的色譜峰,且對(duì)稱性很好,其保留時(shí)間T=8.601min。 5.活性物質(zhì)2006-HS的熱分析結(jié)果表明熔點(diǎn)為84.1℃。通過(guò)元素分析儀測(cè)定出活性物質(zhì)2006-HS中含有C、H和O,三種元素的百分含量分別為74.25%、6.90%和18.85%。結(jié)合質(zhì)譜,計(jì)算出活性物質(zhì)2006-HS的分子量為244.28,推斷出活性物質(zhì)的分子式:C15H16O3。 6.紅外光譜分析說(shuō)明活性物質(zhì)2006-HS的分子結(jié)構(gòu)式中含有C=0基、苯環(huán)

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