1、橋本氏甲狀腺炎（Hashimoto’s thyroiditis, HT）又稱(chēng)慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎，于1912年由日本學(xué)者橋本策博士首先報(bào)道而得名，是人類(lèi)最常見(jiàn)的器官特異性自身免疫性疾病。臨床上，HT常見(jiàn)于女性，患者血清常有多種自身抗體。HT的主要病理學(xué)表現(xiàn)為：甲狀腺內(nèi)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)及次級(jí)淋巴濾泡形成，甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞常嗜酸性變（Hürthle細(xì)胞形成）并進(jìn)行性破壞。 HT不僅會(huì)引起甲狀腺功能持續(xù)低下，而且與甲狀腺癌及惡性淋巴瘤的發(fā)

2、生相關(guān)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量甚至生命。該病雖經(jīng)百年研究，其病因及發(fā)病機(jī)理仍未闡明。大量研究表明，遺傳以及環(huán)境因素與HT的病因密切相關(guān)，其中環(huán)境因素中的病毒感染越來(lái)越受到關(guān)注。但其發(fā)病機(jī)制目前并不清楚。
　　人細(xì)小病毒B19（parvovirus B19, B19）是一種無(wú)包膜單鏈DNA病毒，屬于自主性細(xì)小病毒，與非自主性細(xì)小病毒的區(qū)別即在宿主細(xì)胞中的復(fù)制并不需要其他病毒的參與。是小病毒屬中唯一對(duì)人類(lèi)致病的病毒。B19感染與多種疾

3、病發(fā)生密切相關(guān)，其中，與HT的關(guān)系是該領(lǐng)域的最新發(fā)現(xiàn)之一。實(shí)驗(yàn)室以及美國(guó)、德國(guó)、日本多個(gè)實(shí)驗(yàn)室的獨(dú)立研究表明，B19感染與HT的發(fā)病有關(guān)，但其機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。
　　二十世紀(jì)末，Hoffmann和Beutler先后在果蠅和小鼠細(xì)胞中證實(shí)了Toll樣受體（Toll-like receptors, TLRs）的存在。作為一大類(lèi)細(xì)胞膜受體分子， TLRs能夠識(shí)別病毒等病原微生物，啟動(dòng)固有免疫反應(yīng)并產(chǎn)生大量的促炎癥因子和共刺激分子，誘導(dǎo)

4、適應(yīng)性免疫的發(fā)生。由于這兩位科學(xué)家在先天免疫激活方面的突出貢獻(xiàn)，他們同時(shí)獲得了2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。TLR3作為T(mén)LR家族的重要成員之一，主要表達(dá)于樹(shù)突狀細(xì)胞，通過(guò)識(shí)別病毒dsRNA，激活NF-ΚB,IRF3以及AP-1參與抗病毒反應(yīng)。有研究發(fā)現(xiàn)，TLR3在HT甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞中有表達(dá)，間接提示HT發(fā)生與某種感染有關(guān)。
　　鑒于以上兩方面的研究，推測(cè)B19感染很可能激活了TLR3的表達(dá)。在HT報(bào)道百年之際，我們使用HT

5、連續(xù)切片用免疫組織化學(xué)方法及免疫組織化學(xué)雙標(biāo)記方法，研究了B19和TLR3在HT中的關(guān)系，對(duì)揭示B19感染與HT的發(fā)病機(jī)制提供了新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　【目的】
　　闡明橋本氏甲狀腺炎病變甲狀腺組織中B19感染與 TLR3間的關(guān)系，為HT的病毒病因?qū)W提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　【方法】
　　1.用免疫組織化學(xué)SP法分別在HT標(biāo)本中檢測(cè)B19及TLR3的表達(dá)情況，利用Image Pro-Plus6.0軟件得到陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，計(jì)

6、算陽(yáng)性率。
　　2.用免疫組織化學(xué)雙標(biāo)法分析B19及TLR3在HT病變甲狀腺組織中的共表達(dá)（或共定位）情況。
　　3.采用spearman等級(jí)相關(guān)分析B19和TLR3在HT中的相關(guān)性，應(yīng)用Fisher精確概率法分析B19和TLR3在HT和正常甲狀腺組織中表達(dá)的差異。
　　【結(jié)果】
　　1.B19和TLR3主要表達(dá)在HT病變甲狀腺組織中近淋巴濾泡的甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞內(nèi)。33例HT病例中，29例 B19陽(yáng)性，4例陰性

7、；33例HT病變甲狀腺組織均表達(dá)TLR3。而在5例正常甲狀腺組織中兩者均為陰性。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，TLR3和B19在HT（33/33,100％;29/33，88％）和正常甲狀腺組織中的表達(dá)具有顯著差異TLR3（p＜0.001），B19（p＜0.001）。
　　2.對(duì)33例HT標(biāo)本TLR3和B19陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算陽(yáng)性率并進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)在HT中B19和TLR3表達(dá)呈顯著正相關(guān)（r=0.565, p=0.001）。