1、目的：
　　 宮頸癌是發(fā)展中國家婦女最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率占女性生殖器官惡性腫瘤的首位。近年來隨著分子生物學的發(fā)展,國內外研究報道:一些類型鉀離子通道在宮頸癌中大量表達,并與宮頸癌發(fā)生發(fā)展密切相關。因此,對鉀離子通道的研究已引起臨床的高度重視。鉀離子通道是鑲嵌在細胞膜脂質中的蛋白復合體,應用分子生物學技術來檢測細胞周期蛋白如cyclinD,細胞信號通道及DNA合成等都證明鉀通道阻斷劑能夠抑制細胞周期G1期的進展[1-3]。鈣

2、離子激活鉀離子通道,目前已知存在3種不同的亞單位:高電導鈣離子激活鉀離子通道(BKCa)、中電導鈣離子激活鉀離子通道(IKCa)、低電導鈣離子激活鉀離子通道(SKCa)。有研究報道鈣離子激活鉀離子通道在多種腫瘤細胞中有表達,如前列腺癌[4]、神經(jīng)膠質細胞瘤、胃癌、胰腺癌、垂體瘤、乳腺癌、直腸癌和結腸癌[5]。在宮頸癌細胞系中有表達,而其在宮頸癌活體組織中的表達情況如何,與細胞增殖、分化和預后有何關系尚不清楚。因此,本研究選取BKCa檢測

3、其在正常宮頸組織和宮頸癌及宮頸癌放化療前后組織中的表達情況,探討B(tài)KCa基因表達與宮頸癌發(fā)生,發(fā)展的關系及放絲療對其影響。
　　 材料與方法
　　 一、實驗材料
　　 1、標本
　　 取自中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院婦科2006年至2009年間病理證實為宮頸癌標本30例,正常宮頸組織標本10例,同一宮頸癌患者治療前及放化療兩周時標本10對,將這些新鮮組織貯存于一80攝氏度冰箱中保存,以供日后提取RNA所用。宮

4、頸癌患者的臨床資料包括(1)年齡,(2)臨床分期(FIGO),(3)組織學分類。
　　 2、試劑
　　 RNAiso Reagent(Total RNA提取試劑),TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver3.0(寶生物工程(大連)有限公司),BKCa及β-actin上2游及下游特異性引物由日本TaKaRa公司合成。
　　 二、實驗方法
　　 RT-PCR技術
　　 三、結果判定

5、　　 BKCamRNA通過PCR儀擴增后,行瓊脂糖凝膠電泳,紫外燈下觀察結果,并通過測量灰度值對其進行半定量分析。
　　 四、統(tǒng)計學處理
　　 所有數(shù)據(jù)資料用SPSS13.0進行處理,各組計量資料的結果采用f檢驗,P<0.05有統(tǒng)計學意義。
　　 結 果
　　 1、正常宮頸組織和宮頸癌中BKCa mRNA的表達
　　 BKCa mRNA在正常宮頸組織中的表達的灰度值的比值為0.6720,與宮頸癌

6、組織中的1.2464相比,有顯著性差異(P=0.001)
　　 2、宮頸癌的各種臨床病理因素間的BKCa mRNA的關系
　　 BKCa mRNA在G1期中表達為0.9943、G2期為1.1360,與G3期的1.5788相比有顯著性差異(P=0.002),BKCa mRNA在宮頸癌Ⅰ-Ⅱ期中表達為1.0842,在Ⅲ-Ⅳ期中表達為3.5688,兩者有顯著性差異(P=0.001)。在年齡≥50歲組BKCamRNA的表達為1.

7、2207與年齡<50歲組的1.2918比較,二者之間無顯著性差異(P=0.658)
　　 3、放化療前及放化療兩周時BKCa mRNA的表達
　　 BKCa mRNA在放化療前的宮頸癌組織中表達為1.1359,放化療兩周時BKCamRNA表達為0.5730相比,二者相比有顯著性差異(P<0.001)
　　 結 論
　　 1、BKCa基因參與宮頸癌惡性增殖過程,提示BKCa通道與宮頸癌細胞增值有關。