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1、本試驗(yàn)利用浸種法與花粉管通道法將外源DNA導(dǎo)入玉米自交系,其后代產(chǎn)生了多種變異類型,變異性狀十分豐富,主要包括:農(nóng) 藝性狀的變異(如株高、穗位高、葉片數(shù)、葉片形狀與顏色、葉 片的長(zhǎng)度與寬度、光合葉面積、百粒重和生育期等)。這些變異性 狀產(chǎn)生了新的性狀,并且在D<,3>代趨向穩(wěn)定。并進(jìn)行了過氧化物酶 同工酶酶譜,葉綠素含量,營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)等分析。通過三年種植,綜 合各項(xiàng)測(cè)定指標(biāo)及農(nóng)藝性狀觀察,從中選出了一些遺傳穩(wěn)定的優(yōu) 良變異材料,
2、具體結(jié)果如下: 1.浸種法 提取供體大豆DNA,以300ug/mI濃度,導(dǎo)入受體糯12-9-10玉米自交系,在D<,0>代獲得了7.74%的變異率。分析過氧化物酶同工酶酶譜,結(jié)果表明:變異植株的過氧化物酶同工酶在RF-12,RF=13處比受體少兩條酶帶,其余的酶帶與受體相同。從D<,0>到D<,3>代連續(xù)4代田間性狀觀察統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),變異植株的株高、穗位高、光合葉面積等均有變化。D<,3>一1 0②株高比對(duì)照(117cm)
3、矮3.67cm;D<,3>-10①葉面積比對(duì)照(203.99 cm<'2>)大229.04cm<'2>。但由于雄性不育,在D<,2>代和D<,3>代的幾個(gè)株系未收獲到種子。 2.花粉管通道法提取供體甘蔗DNA,以3001μg/ml、5001μg/ml濃度,在受體(普通玉米自交系7313)自交授粉后18h、20h、22h、24h導(dǎo)入。對(duì)不同導(dǎo)入時(shí)間和導(dǎo)入濃度的變異株的農(nóng)藝性狀觀察、統(tǒng)計(jì)與分析,結(jié)果表明這些變異表現(xiàn)為:株高變矮、生育
4、期縮短、百粒重增重、葉面積增加等,并且多數(shù)性狀在D<,3>代就趨于穩(wěn)定,中只有個(gè)別性狀分離。從中選出2個(gè)早熟、矮桿的變異株系20-500①和20-500②:生育期提前3天;株高分別為144.16cm和148.32 cm,比對(duì)照(169.2 cm)減少了25.04 cm和20.88cm。同時(shí)對(duì)20-500處理獲得的變異株進(jìn)行過氧化物酶同工酶酶譜分析,結(jié)果表明變異后代與受體間有明顯的差異(如變異株在遷移率為Rf<,11>1=0.51出現(xiàn)供體
5、甘蔗酶帶,且顏色一樣即酶活性不變;在Rf<,14>=0.62也出現(xiàn),但顏色變淺,酶活性減弱,而在受體對(duì)照(普7313)沒有這兩條酶帶)。對(duì)D<,3>代穩(wěn)定株系籽粒的糖分、蛋白質(zhì)、淀粉含量進(jìn)行測(cè)定分析,發(fā)現(xiàn)這些株系既能保持原有的性狀,又增加了新的優(yōu)良性狀:(蛋白質(zhì)、淀粉和糖分含量增加)如20-500①和20-500②,可溶性糖含量在25天和30天分別為4.41%和1.63%,比受體對(duì)照(1.58%和1.28%)提高2.83%和0.35%;
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