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文檔簡介
1、豬瘟是危害我國養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染性疾病之一,目前主要應(yīng)用疫苗進行預(yù)防。由于疫苗質(zhì)量參差不齊以及豬免疫低下等原因,常常產(chǎn)生免疫失敗,導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟損失。許多中藥具有抗病毒和增強免疫的作用,且應(yīng)用安全,與疫苗聯(lián)合使用可增加疫苗免疫效果。本實驗對主要成分為黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿的扶正解毒顆粒進行研究,比較了不同劑量的扶正解毒顆粒對豬瘟疫苗免疫效果的影響。
實驗設(shè)置了6個組,分別為空白組、免疫不給藥組、黃芪多糖組(0.5g/Kg.b.w)
2、和扶正解毒顆粒低(0.2g/Kg.b.w)、中(0.4g/Kg.b.w)、高(0.8g/Kg.b.w)劑量組。首先,檢測了6組免疫后第0、10、20、30、40天豬的血常規(guī)指標(biāo)(RBC、Hb)和血生化指標(biāo)(AST、ALT)。其次,檢測了6組免疫后第0、7、14、24、34、44、54、69、79天時豬外周血液中CFSV抗體含量,以及第0、10、20、30、40天時IgG、IgM抗體含量,并采用流式細(xì)胞術(shù)檢測了嗜中性粒細(xì)胞吞噬率,以此來評
3、價扶正解毒顆粒對豬瘟疫苗免疫后豬體液免疫應(yīng)答的影響;接著,采用CD3+、CD4+、CD8+熒光標(biāo)記抗體結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測了豬瘟疫苗免疫后第10、20、30、40天時各組豬外周血中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞的比例,比較了各組CD4+/CD8+比值,并以CCK-8法檢測了由ConA刺激的外周血淋巴細(xì)胞增值率,以此來評價扶正解毒顆粒的使用對豬瘟疫苗免疫后豬細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響;最后,檢測了豬瘟疫苗免疫后第10、20、30、40天時各組豬
4、外周血中SOD的活性,以此來檢測扶正解毒顆粒的使用對豬瘟疫苗免疫后豬體內(nèi)SOD活性的影響。
血常規(guī)和血生化指標(biāo)檢測結(jié)果顯示,空白組、免疫不給藥組和各給藥組豬在第0、10、20、30、40天的RBC、Hb、AST、ALT結(jié)果均無顯著差異,表明扶正解毒顆粒的使用對豬的健康沒有不良影響。
豬瘟抗體檢測結(jié)果顯示,注射豬瘟疫苗后第54天各組豬的CSFV抗體阻斷率達(dá)到峰值;低、中、高劑量扶正解毒顆粒均能增加豬外周血中CSFV抗體
5、含量;其中中劑量組效果最明顯,該劑量組在免疫后第14天中劑量扶正解毒顆粒與豬瘟疫苗免疫聯(lián)合應(yīng)用組豬的CFSV抗體的阻斷率就以達(dá)到50%以上;低、高劑量扶正解毒顆粒和黃芪同樣能增加CFSV抗體的阻斷率,但除第54天外,其余時間檢測的CSFV抗體阻斷率與免疫不給藥組無顯著差異。外周血中IgG和IgM檢測結(jié)果顯示,豬瘟疫苗免疫后第20天IgM的含量便迅速增加,早于IgG的出現(xiàn);IgG抗體在第40天才檢測到顯著的增加;低、中、高劑量扶正解毒顆粒
6、均能增加豬瘟疫苗免疫后豬外周血中IgG和IgM的含量;其中,高劑量組的效果高于中劑量組和黃芪組,但是差異不顯著(p>0.05)。低、中、高劑量扶正解毒顆粒對嗜中性粒細(xì)胞吞噬功能無增強作用。
T淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果顯示,免疫后第10~20天,各組T細(xì)胞亞群比例均無顯著變化,亦無顯著差異(p>0.05);在第30~40天,中、高劑量組能顯著增加豬瘟疫苗免疫后豬外周血中 CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞比例(與免疫不給藥組差異顯著,
7、p<0.05),且能保持CD4+/CD8+比值的穩(wěn)定;淋巴細(xì)胞增殖率檢測結(jié)果顯示,低、中、高劑量的扶正解毒顆粒均能增加疫苗免疫后外周血淋巴細(xì)胞的ConA刺激指數(shù),且增加的強弱與實驗中用藥的濃度成正比。
超氧化物歧化酶(SOD)活力檢測結(jié)果顯示,中、高劑量扶正解毒顆粒能顯著增加豬瘟疫苗免疫后豬外周血中的SOD活性(與免疫不給藥組差異顯著,p<0.05),中高劑量組之間無顯著差異(p>0.05)。
本研究結(jié)果證明,中、高
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