甘藍(lán)的染色體分析與SRK基因的染色體定位研究.pdf_第1頁(yè)
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1、蕓薹屬具有一個(gè)由多基因控制的典型的孢子體自交不親和系統(tǒng),在單倍體中是單一的S位點(diǎn)控制的自交不親和系統(tǒng)。幾個(gè)S基因和S相關(guān)基因已經(jīng)得到分離和遺傳及生化鑒定。SLG和SRK基因與S位點(diǎn)緊密連鎖,并直接參與自交不親和反應(yīng)。白交不親和反應(yīng)從花粉攜帶的配體S位點(diǎn)蛋白11(即SP11/SCR)和對(duì)應(yīng)的柱頭S受體激酶SRK之間發(fā)生特異性的相互作用開(kāi)始的。SRK與SP11特異性的結(jié)合引起SRK基因的自動(dòng)磷酸化,然后引發(fā)一系列導(dǎo)致白花花粉受到排斥的信號(hào)反

2、應(yīng)。修飾基因的隱性突變可以消除柱頭中的SI反應(yīng)。M位點(diǎn)的克隆表明它編碼一個(gè)跨膜的細(xì)胞質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,稱之為M位點(diǎn)蛋白激酶(MLPK)。MLPK的瞬間表達(dá)可以使乳突細(xì)胞具有拒絕白花花粉的能力。這表明MLPK是蕓薹屬自交不親和信號(hào)傳導(dǎo)反應(yīng)中的一個(gè)積極調(diào)節(jié)者。但是對(duì)甘藍(lán)這一作物而言我們到目前仍然不知道控制自交不親和反應(yīng)的S位點(diǎn)基因位于哪些染色體上,或位于哪些染色體的什么位置上。 蕓薹屬是世界范圍內(nèi)具有重要地位而得到廣泛種植的

3、作物品種,它含有三個(gè)基本的染色體組(分別是A,B和C;n=10,8和9)以及分別含有這三個(gè)基本染色體組的純合二倍體和含有以上雙二倍體的異源四倍體種。甘藍(lán)(CC,2n=18)包括花椰菜,卷心菜,花莖甘藍(lán)和布魯塞爾苗四大類。S位點(diǎn)基因在甘藍(lán)染色體上的定位能提供與當(dāng)前已經(jīng)得到研究的分子標(biāo)記圖譜相互補(bǔ)的信息,以及基因在染色體上定位及相關(guān)的染色體結(jié)構(gòu)特征,對(duì)今后開(kāi)展更大范圍的研究具有重要意義, 在本論文中,我們采用熒光原位雜交技術(shù)結(jié)合圖象

4、處理方法,對(duì)甘藍(lán)種B.oleracea.var.capitata.中的SRK單拷貝基因進(jìn)行染色體定位研究,同時(shí)對(duì)該典型自交不親和結(jié)球甘藍(lán)花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂染色體行為進(jìn)行觀察,討論了部分染色體異常行為出現(xiàn)的可能原因及對(duì)甘藍(lán)結(jié)實(shí)率的影響。 1.對(duì)500個(gè)以上典型自交不親和性結(jié)球甘藍(lán)(Brassica.oleraceavar.capitata)純合二倍體花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂各時(shí)期染色體行為觀察表明:純合二倍體甘藍(lán)花粉母細(xì)胞在自然條件下減

5、數(shù)分裂的雙線期,終變期,中期I有高頻率的1~3個(gè)四價(jià)體和高頻率的1~3對(duì)同源染色體提早分離和滯后分離兩種異常情況:這些異常現(xiàn)象表明甘藍(lán)染色體組內(nèi)存在著部分同源現(xiàn)象的同時(shí)也存在著部分異源現(xiàn)象。這證實(shí)了該甘藍(lán)品種確實(shí)是由一染色體數(shù)為6的基本種通過(guò)染色體加倍進(jìn)化而來(lái)的,并可能在進(jìn)化過(guò)程中摻入了外源染色體,同時(shí)討論了甘藍(lán)結(jié)實(shí)率不高與這些染色體異常行為之間的關(guān)系。 2.用PCR擴(kuò)增得到的甘藍(lán)S-受體激酶(S-receptorkinase,

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