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![廣東省鴨疫里氏桿菌耐藥性調(diào)查及floR傳播分子特征研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/4271ca69-7799-46c2-b935-8ece9ac05231/4271ca69-7799-46c2-b935-8ece9ac052311.gif)
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1、鴨疫里氏桿菌感染具有發(fā)病率高、死亡率高的特點(diǎn),是目前引起世界范圍內(nèi)水禽感染的重要疾病,同時(shí)也是造成養(yǎng)鴨業(yè)經(jīng)濟(jì)損失的主要疾病之一。由于鴨疫里氏桿菌極易產(chǎn)生耐藥性,因此給臨床治療帶來(lái)了極大的困擾。目前關(guān)于鴨疫里氏桿菌耐藥性的研究報(bào)道還比較少,尤其是關(guān)于分子耐藥機(jī)制和傳播機(jī)制的研究鮮有報(bào)道。
2013年2月至2015年7月,從廣東省9個(gè)地區(qū)收集具有典型鴨疫里氏桿菌病癥狀的病(死)鴨和鵝的腦、肝組織樣品,分離培養(yǎng)鴨疫里氏桿菌。采用特異
2、性 PCR方法進(jìn)行分子學(xué)鑒定,同時(shí)采用全自動(dòng)微生物鑒定儀來(lái)鑒定疑似菌株,共分離得到115株鴨疫里氏桿菌,其中鴨源54株,鵝源61株。用瓊脂二倍稀釋法測(cè)定32種抗菌藥物的敏感性。藥敏結(jié)果顯示,分離株有很高的耐藥性,有103株(89.6%)鴨疫里氏桿菌分離株存在多重耐藥現(xiàn)象。
采用PCR和測(cè)序方法對(duì)115株分離菌進(jìn)行了耐藥基因和整合子類(lèi)型檢測(cè)和分析。結(jié)果顯示:共有5大類(lèi)抗生素的25種耐藥基因被檢測(cè)出來(lái)。在鴨疫里氏桿菌分離株中首次檢
3、測(cè)出三種氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶基因 aph(3’)-Ⅱ、aph(3’)-Ⅳ、aph(4’)-Ⅰa,氨基糖苷轉(zhuǎn)移酶基因aadB,紅霉素耐藥基因ermB、ermC和磺胺類(lèi)抗菌藥物耐藥的sul3。9株鴨疫里氏桿菌株含有1類(lèi)整合子,其中6株攜帶978bp大小的aadA2基因盒和3株攜帶2287bp大小的aac(6’)-Ⅱ-catB3-aadA1基因盒。
對(duì)分離得到的菌株進(jìn)行SmaI-PFGE分子分型,共有58株分型成功,得到16種不同的S
4、maI-PFGE型(以相似度≥90%為判定標(biāo)準(zhǔn)),包括11個(gè)簇和5個(gè)單一型。本研究中的鴨疫里氏桿菌分離株存在廣泛的克隆傳播,且克隆傳播存在于不同種屬的宿主動(dòng)物(鴨和鵝)間及相同、不同地區(qū)間分離到的菌株中。
為探究抗生素耐藥性與生物膜的相關(guān)性,用結(jié)晶紫染色的方法定量測(cè)定生物膜形成能力。結(jié)果表明,有95(82.6%)株鴨疫里氏桿菌分離株具有產(chǎn)膜能力,其中40(34.8%)株是強(qiáng)產(chǎn)膜菌株,且對(duì)12~23種抗菌藥物具有抗藥性;25(2
5、1.7%)中等產(chǎn)膜株和30(26.1%)弱產(chǎn)膜菌株可對(duì)7~12種種抗菌藥物耐藥。20(17.4%)株沒(méi)有產(chǎn)膜能力,耐藥種數(shù)小于等于6種??梢钥闯錾锬ば纬赡芰εc耐藥譜的種數(shù)之間存在一定的關(guān)系。
此外,通過(guò)S1-PFGE和雜交的方法確定鴨疫里氏桿菌中floR基因既位于染色體上也位于質(zhì)粒上,發(fā)現(xiàn)在13株鴨疫里氏桿菌中存在一個(gè)新型攜帶floR基因的質(zhì)粒,其大小>23kb,與之前的報(bào)道的質(zhì)粒不同。通過(guò)接合轉(zhuǎn)移和質(zhì)粒穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)等方法證明
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