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文檔簡介
1、研究背景與目的 神經干細胞(neuralstemcell,NSC)是近年來神經科學領域的研究熱點。NSC是具有多向分化潛能和自我更新的能力細胞,NSC的增殖分化為神經系統(tǒng)損傷和變性疾病的治療帶來了新希望。帕金森病(Parkinsondisease,PD)是多巴胺能神經元減少或者消失導致的神經系統(tǒng)病變,增加DA能神經元是治療該疾病的一種策略,通過對NSC進行體外誘導有望獲得足量的有效多巴胺能神經元,為細胞移植治療研究打下基礎。本試
2、驗目的通過用IL一1p、AA、IL—lp聯(lián)合AA誘導NSC分化生成多巴胺能神經元,為深入研究NSC體外分化條件,探討誘導分化機制,提高DA能神經元分化效能奠定細胞學基礎。 方法 分離培養(yǎng)新生(1日齡)SD大鼠中腦神經干細胞,通過傳代培養(yǎng)擴增來檢測自我更新能力;免疫學方法檢測NSC特異性標志nestin蛋白表達和分化成為神經元、神經膠質細胞能力。對NSC克隆進行IL一1p、AA、IL一1p聯(lián)合AA(抗壞血酸)誘導分化,通過
3、免疫細胞學方法檢測多巴胺能神經元標志物酪氨酸羥化酶(tyrosinetydroxylase,TH)表達。 結果 培養(yǎng)細胞克隆均表達nestin,分化細胞表達NSE和GFAP,體外培養(yǎng)10代細胞數(shù)目增加41倍;IL—lp、AA單獨誘導均提高TH陽性細胞表達,與血清對照組比較有顯著性差異(P<0.05),IL一1p聯(lián)合AA與單獨應用IL一1p組比較能夠顯著提高TH陽性細胞率,二者有顯著性差異(P<0.05)。 結論
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