1、本文探討PCR結合DNA測序技術檢測真菌性角膜炎的臨床應用價值。 方法：應用半巢式PCR擴增ITS2/5.8SrDNA區(qū)域來檢測標準真菌菌株和15例臨床疑診真菌性角膜炎患者角膜刮片中的真菌DNA。結果與涂片鏡檢和真菌培養(yǎng)的診斷陽性率相比較。另外，在第一輪擴增中，同時檢測標本中的真菌和細菌DNA，以確定是否合并細菌感染。結果：應用半巢式PCR技術所有標準真菌和12例臨床疑診真菌性角膜炎的角膜刮片中真菌檢測均呈陽性，但是標準細菌和正

2、常人角膜組織真菌檢測均陰性，擴增片段長約290bp，半巢式PCR擴增共耗時5小時。DNA測序確定菌種。敏感性為75﹪，真菌培養(yǎng)敏感性為86.6﹪；鏡檢敏感性為40﹪。通過孢子稀釋法檢測，MPCR和半巢式PCR的檢測靈敏度分別為5個和1個茄病鐮刀菌孢子。DNA測序后確定了菌種。 結論：擴增ITS2/5.8SrDNA的半巢式PCR及DNA序列分析技術是一種快速、敏感、特異、可靠的診斷真菌性角膜炎的實驗室方法，為后續(xù)的臨床治療打下了良