1、目的：利用原子力顯微技術(AFM)研究原代培養(yǎng)的海馬神經元和神經膠質細胞表面超微結構及相互間的連接結構。 材料和方法：取新生12小時以內的Wistar大乳鼠，在無菌條件下原代培養(yǎng)海馬神經元和神經膠質細胞。選擇生長良好的海馬神經元和膠質細胞用2.5％的戊二醛(生理鹽水配制)固定30min，然后用流動三蒸水輕輕沖洗樣品，以去除樣品表面的鹽結晶。把培養(yǎng)皿剪成合適大小，用雙面膠固定于基底上，待其在空氣中自然干燥后，置于AFM的掃描器上，

2、進行掃描成像，成像模式為大氣環(huán)境下的接觸模式(Contact Mode)。 結果：本實驗中培養(yǎng)的海馬神經元和神經膠質細胞生長狀態(tài)良好。利用AFM觀察顯示：(1)正常海馬神經元表面光滑，起伏均勻、規(guī)律，神經元多為單個生長，突起之間交織成網，相互間有突觸形成。海馬神經元可被胞體上水平的凹溝分為上中下三部分或上下兩部分，神經突起均自胞體上部發(fā)出，而沒有從下部發(fā)出者。同時，我們還觀察到海馬神經元間存在膜性連接以及長程非突觸性突起連接結構

3、；(2)神經膠質細胞平鋪于培養(yǎng)皿的底部，胞體形狀不規(guī)則，表面較扁平，高度平均為780nm，絕不會超過1μm。突起豐富，但沒有極性，無軸突樹突之分，還觀察到兩膠質細胞間存在長程纖維管狀連接結構。 結論：在以往的工作中利用AFM觀察到海馬神經元和膠質細胞表面一些利用其它顯微技術難以發(fā)現(xiàn)的超微結構，還發(fā)現(xiàn)了一些用突觸結構難以解釋的連接結構： (1)再次證明原子力顯微技術是研究細胞表面超微結構的有用工具； (2)神經元和

4、膠質細胞在原子力顯微鏡下具有明顯的形態(tài)學差異，神經元表面飽滿光滑，高度至少在2μm以上。胞體具有明顯的極性，其一端較大，樹突從此端發(fā)出，另一端較小，軸突從此端發(fā)出；突起發(fā)育到一定程度，其極性清晰可辨，有軸突樹突之分。海馬神經元可被胞體上水平的凹溝分為上中下三部分或上下兩部分，神經突起均自胞體上部發(fā)出，而沒有從下部發(fā)出者；膠質細胞表面較為扁平，高度平均為780nm，絕不會超過1μm。其突起較為豐富，但沒有極性，無軸突、樹突之分；