1、目的 奧卡西平是一種新型抗癲癇藥，由于其耐受性好、毒副作用小及藥物間的相互作用少而逐漸成為目前一線抗癲癇藥卡馬西平的替代藥物。奧卡西平為卡馬西平10-酮基衍生物，兩者結(jié)構(gòu)十分相似但體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特性及臨床不良反應(yīng)存在較大差異。本試驗(yàn)研究了健康受試者口服奧卡西平及卡馬西平后體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特性，同時(shí)評(píng)價(jià)了奧卡西平國(guó)產(chǎn)制劑與進(jìn)口制劑的生物等效性，基于卡馬西平藥動(dòng)學(xué)特性存在較大的個(gè)體差異，我們初步設(shè)計(jì)了卡馬西平個(gè)體化給藥方案，為臨床用藥準(zhǔn)確性、合理性提

2、供理論依據(jù)；同時(shí)我們還從微觀角度研究了結(jié)構(gòu)差異影響藥物代謝的可能的機(jī)制問(wèn)題。 方法 1.奧卡西平藥動(dòng)學(xué)研究：健康志愿者20名，按體重隨機(jī)分為2組，每組10人，進(jìn)行雙交叉試驗(yàn)，單劑量口服試驗(yàn)和參比的奧卡西平片300mg。以HPLC法測(cè)定血漿中奧卡西平濃度，計(jì)算得到藥代參數(shù)。 2.卡馬西平藥動(dòng)學(xué)研究：以HPLC法測(cè)定12位健康受試者單劑量口服卡馬西平片200mg后的血藥濃度。以非房室模型計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)作為實(shí)測(cè)值，并與經(jīng)3P

3、97軟件進(jìn)行房室模型擬合后得到的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)擬合值進(jìn)行比較分析。 3.卡馬西平個(gè)體化給藥方案設(shè)計(jì)：以“卡馬西平藥動(dòng)學(xué)研究”中的12位受試者藥動(dòng)學(xué)參數(shù)作為群體參數(shù)。運(yùn)用MOE軟件的QuaSar-mode，以PLS法，將群體藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與個(gè)體內(nèi)在因素間做逐步回歸分析，建立藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與個(gè)體特性間的回歸方程，從而獲取個(gè)體藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的預(yù)測(cè)值，將預(yù)測(cè)誤差(PE=Yobs-Yprep)和相關(guān)系數(shù)(R=Yprep：Yobs)作評(píng)價(jià)指標(biāo)。以個(gè)體參數(shù)法

4、及血藥濃度一點(diǎn)法預(yù)測(cè)維持劑量。 4.結(jié)構(gòu)差異對(duì)代謝影響的理論研究：選擇卡馬西平、奧卡西平和10-羥基卡馬西平，分別與CYP3A4(代碼1WOG)、CYP2C8(代碼1pq2)酶的晶體結(jié)構(gòu)2進(jìn)行分子對(duì)接。采用DOCK5軟件進(jìn)行對(duì)接計(jì)算，所用力場(chǎng)為amber99，計(jì)算結(jié)合能作為評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。以AM1方法計(jì)算配體小分子電荷分布。 結(jié)果 1.奧卡西平藥動(dòng)學(xué)研究：口服參比制劑及試驗(yàn)制劑后，Cmax分別為0.94±0.44及0.％±0

5、.41μg/ml，Tpeak分別為1.07±0.35及0.99±0.36h，AUC分別為2.40±0.52及2.20±0.43(μg.h)/ml，t1/2分別為2.41±0.60及2.40±0.58h，各參數(shù)間均無(wú)統(tǒng)計(jì)差異(P＞0.05)。試驗(yàn)制劑相對(duì)于參比制劑的生物利用度為94.7±18.2％，試驗(yàn)制劑的Cmax和AUC分別落在參比制劑Cmax(0.7-1.43)和AUC(0.8-1.25)的等效范圍之內(nèi)。 2.卡馬西平藥動(dòng)學(xué)

6、研究：卡馬西平的線性范圍為0.05～10μg/ml，最低檢測(cè)濃度為0.05μg/ml，方法的平均回收率為94.4％。單劑量口服卡馬西平后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)實(shí)測(cè)值為：Cmax=4.71±0.99μg/ml，Tpeak=16±12h，AUC=361.62±49.43(μg.h)/ml，t1/2=38.39±6.37h。經(jīng)3P97程序擬合卡馬西平血漿濃度符合一級(jí)吸收的一房室模型。 3.卡馬西平個(gè)體化給藥方案設(shè)計(jì)：經(jīng)過(guò)交叉驗(yàn)證后，得到最終優(yōu)化

7、的各藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的逐步回歸方程：Ka=0.6789-0.0035X2-0.0722X3-0.0017X4-0.0026X6；Ke=0.02714-0.0005X1+0.00009X3-0.00175X5+0.00029X6；Vd=1.2734+0.00841X1-0.01084X2-0.06398X3；CL=0.03423-0.01404X2-0.00759X3-0.00211X5。C72預(yù)測(cè)值與實(shí)測(cè)值比較，相關(guān)系數(shù)大于0.9，經(jīng)統(tǒng)計(jì)配對(duì)

8、t-檢驗(yàn)無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 4.結(jié)構(gòu)差異對(duì)代謝影響的理論研究：配體小分子卡馬西平、奧卡西平和10-羥基卡馬西平與CYP3A4均有較好的結(jié)合，各種結(jié)合模式之間的取向選擇性較小，卡馬西平與CYP3A4的結(jié)合模式中除了卟啉環(huán)中心的鐵與芳環(huán)間的作用外還具有10，11位結(jié)合的可能；與CYP2C8的對(duì)接結(jié)果顯示，CYP2C8只能與奧卡西平和卡馬西平結(jié)合，可能結(jié)合的模式非常少，對(duì)結(jié)構(gòu)的選擇性相對(duì)較高，主要產(chǎn)物可能為苯環(huán)氧化物。電荷

9、分布情況中卡馬西平的10和11位上連接的氫電荷與苯環(huán)上氫電荷非常接近，表明這兩個(gè)位置的氫所連接的碳參與了雜化，具有芳香性。OCBZ和MHD10和11位氫的電荷與苯環(huán)氫電荷差異相對(duì)較大，表明這兩個(gè)分子的10、11位的碳沒(méi)有芳香性。 結(jié)論 奧卡西平國(guó)產(chǎn)片具有與進(jìn)口制劑生物等效的特性，表明國(guó)產(chǎn)制劑可以成為進(jìn)口制劑的替代治療藥物，使奧卡西平在我國(guó)臨床更容易普及使用。而對(duì)于長(zhǎng)期服用卡馬西平的患者，本文基于QuaSar-modePLS原理

10、提出了一種預(yù)測(cè)卡馬西平個(gè)體化給藥方案的非穩(wěn)態(tài)法的嘗試，結(jié)果表明，該方法較傳統(tǒng)一點(diǎn)法中個(gè)體參數(shù)常以群體均值替代的模糊估測(cè)更加準(zhǔn)確，具有較大的臨床價(jià)值。電荷分布結(jié)果表明，CBZ的10和11位上連接的氫電荷與苯環(huán)的氫非常接近，表明這兩個(gè)位置參與了雜化，具有芳香性。OCBZ和MHD10和11位上連接的氫與苯環(huán)電荷差異相對(duì)較大，表明這兩個(gè)位沒(méi)有芳香性。CYP3A4對(duì)底物選擇性較小，CBZ與OCBZ和MHD都可能被CYP3A4進(jìn)行苯環(huán)氧化，但只有C