1、目的：探討血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelia growth factor,VEGFl65)小干擾RNA(small interference,siRNA)對(duì)鼠視網(wǎng)膜新生血管的抑制作用。 方法：①采用Smith的方法，將出生后7d的C57BL/6J小鼠置于氧艙，控制氧濃度75％±3％，5天后回到正常氧環(huán)境，喂養(yǎng)7天后處死；采用異硫氰酸熒光素.葡聚糖(FITC-Dextran)熒光造影視網(wǎng)膜鋪片觀察視網(wǎng)膜新生血

2、管的形態(tài)，鑒定視網(wǎng)膜新生血管模型；②將出生后7d的8只小鼠于空氣中喂養(yǎng)，為正常組。③另24只出生后7d的小鼠放入75％±3％的高氧環(huán)境中(同Smith方法)，5d后出艙并隨機(jī)分為3組：對(duì)照組、空載體組和基因治療組。出艙當(dāng)天，空載體組小鼠玻璃體腔內(nèi)注射空載體pSilencer2.1-U6 hygro，基因治療組注射VEGF<,165>siRNA表達(dá)質(zhì)粒pSilencer2.1-U6 hygro，均采用脂質(zhì)體介導(dǎo)。對(duì)照組小鼠不作任何處理。④

3、注射后7d，采用FITC-Dextran熒光造影視網(wǎng)膜鋪片觀察視網(wǎng)膜新生血管的形態(tài)變化，采用免疫組織化學(xué)方法檢測視網(wǎng)膜中VEGF的表達(dá)差異，采用常規(guī)病理切片統(tǒng)計(jì)突破內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞核數(shù)。 結(jié)果：①熒光造影視網(wǎng)膜鋪片發(fā)現(xiàn)，正常組整個(gè)視網(wǎng)膜血管分布呈規(guī)則均勻的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。對(duì)照組和空載體組視網(wǎng)膜血管不規(guī)則擴(kuò)張，中周邊部有大量血管新生?；蛑委熃M后極部視網(wǎng)膜血管迂曲及不規(guī)則擴(kuò)張較對(duì)照組和空載體組明顯減輕。②免疫組織化學(xué)染色顯示，正

4、常組視網(wǎng)膜中VEGF呈弱陽性表達(dá)；對(duì)照組和空載體組視網(wǎng)膜中VEGF呈強(qiáng)陽性表達(dá)?；蛑委熃M與對(duì)照組和空載體組相比較，VEGF的表達(dá)明顯減少。③病理切片顯示，正常組很少見到突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞核，而對(duì)照組和空載體組中均有大量，其發(fā)生率為100％。基因治療組(6.83±4.72)較對(duì)照組(11.57±5.85)和空載體組(11.53±6.15)明顯減少。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，除對(duì)照組和空載體組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(P>0.05)，其余各