1、研究目的:1.采用新的化學(xué)處理方法清除大鼠脛神經(jīng)和兔腓神經(jīng)中的細(xì)胞和髓鞘、保留基底膜,萃取長段的神經(jīng)支架.2.觀察化學(xué)萃取異體神經(jīng)支架修復(fù)大鼠面神經(jīng)缺損后近期神經(jīng)再生的情況.3.觀察化學(xué)萃取異體神經(jīng)支架修復(fù)神經(jīng)缺損Schwann細(xì)胞的變化情況.4.探索化學(xué)萃取神經(jīng)支架用于異種移植,橋接面神經(jīng)缺損的可行性.方法:1.切取10只大鼠脛神經(jīng)和10只兔腓神經(jīng),以Triton X-100溶液和脫氧膽酸鈉溶液按一定濃度和程序進(jìn)行化學(xué)處理.萃取神經(jīng)及

2、新鮮神經(jīng)行HE染色、Luxolfast blue髓鞘染色,以觀察細(xì)胞、髓鞘;S100和Laminin免疫組織化學(xué)染色以顯示Schwann細(xì)胞及其基底板層;毛細(xì)血管堿性磷酸酶化學(xué)染色以顯示毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞.2.60只大鼠隨機(jī)分成三組:A組-自體脛神經(jīng)移植組,B組-化學(xué)萃取異體脛神經(jīng)移植組和C組-新鮮異體脛神經(jīng)移植組,每組20只.大鼠一側(cè)面神經(jīng)下頜緣支缺損6mm的模型,以上述三種移植物橋接修復(fù).術(shù)后5個(gè)月通過神經(jīng)電生理、HRP逆行示蹤、再生

3、神經(jīng)纖維的HE染色、Luxol fast blue髓鞘染色、免疫組織化學(xué)染色、美藍(lán)染色及透射電鏡等檢測手段觀察其效果.3.50只大鼠隨機(jī)分為五組:D、E、F、G、H,每組10只,均行化學(xué)萃取異體神經(jīng)移植修復(fù)面神經(jīng)缺損.分別于術(shù)后1周、10天、2周、4周和8周取材,行移植段及其近、遠(yuǎn)段的S100蛋白免疫組織化學(xué)染色.4.120只大鼠隨機(jī)分為6組:I組-自體神經(jīng)移植實(shí)驗(yàn)組,J組-新鮮異種神經(jīng)支架移植實(shí)驗(yàn)組,K組-預(yù)變1周異種神經(jīng)支架移植實(shí)驗(yàn)