1、香蕉是呼吸躍變型果實(shí)，成熟啟動(dòng)后果實(shí)迅速軟化，給貯運(yùn)保鮮帶來(lái)很大困難。許多研究表明，ERF轉(zhuǎn)錄因子和組蛋白去乙?；福℉DAC）在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。我們前期的研究發(fā)現(xiàn)，與成熟密切相關(guān)的MaERFs不僅可以反饋調(diào)控乙烯合成基因MaACS1和MaACO1，而且可以與MaACO1蛋白相互作用，從而參與香蕉果實(shí)成熟過(guò)程的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。然而，HDAC是否參與以及怎樣參與ERF調(diào)控香蕉果實(shí)成熟機(jī)制目前并不清楚。本文在明確MaERF11

2、參與香蕉果實(shí)成熟的基礎(chǔ)上，通過(guò)通過(guò)凝膠組織遷移實(shí)驗(yàn)（EMSA）、雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)（DLR）、蛋白互作技術(shù)和染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）等多種實(shí)驗(yàn)手段深入研究了HDAC參與ERF調(diào)控香蕉果實(shí)成熟機(jī)制，我們的研究結(jié)果拓寬了果實(shí)成熟的轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，尤其是在組蛋白去乙?；揎梾⑴c調(diào)控果實(shí)成熟機(jī)制方面加深了人們對(duì)果實(shí)成熟及其調(diào)控機(jī)制的認(rèn)識(shí)。本文獲得的主要研究結(jié)果和結(jié)論如下：
　　1.MaERF11具轉(zhuǎn)錄抑制活性，它可以結(jié)合乙烯合成基因

3、MaACO1和3個(gè)果實(shí)軟化相關(guān)基因MaEXP2/7/8的啟動(dòng)子，進(jìn)而參與調(diào)控香蕉果實(shí)的成熟過(guò)程。EMSA和ChIP實(shí)驗(yàn)表明，MaERF11可以結(jié)合乙烯合成基因MaACO1和3個(gè)果實(shí)軟化相關(guān)基因MaEXP2/7/8的啟動(dòng)子。另外，DLR檢測(cè)結(jié)果顯示，MaERF11具有轉(zhuǎn)錄抑制活性，能抑制下游基因MaACO1和MaEXP2/7/8的啟動(dòng)子活性。這些結(jié)果說(shuō)明，MaERF11作為轉(zhuǎn)錄抑制子，可以通過(guò)對(duì)乙烯合成基因MaACO1和果實(shí)軟化相關(guān)基因M

4、aEXP2/7/8的抑制作用來(lái)調(diào)控乙烯的合成和果實(shí)的軟化。
　　2.成熟相關(guān)基因MaACO1和MaEXP2/7/8的表達(dá)及其組蛋白乙?；阶兓c果實(shí)成熟密切相關(guān)。熒光定量PCR（qRT-PCR）結(jié)果顯示，MaACO1和MaEXP2/7/8基因的表達(dá)在采后香蕉后熟進(jìn)程中均呈現(xiàn)不同程度的上升趨勢(shì)。ChIP結(jié)果顯示，成熟香蕉果實(shí)的MaACO1和MaEXP2/7/8基因染色質(zhì)上的組蛋白H3和H4的乙酰化水平會(huì)高于未成熟的香蕉，這與基因的

5、表達(dá)趨勢(shì)相吻合。這些結(jié)果說(shuō)明，MaACO1和MaEXP2/7/8的表達(dá)及其染色質(zhì)上組蛋白的乙?；脚c香蕉果實(shí)成熟密切相關(guān)。
　　3.MaERF11通過(guò)招募MaHDA1形成轉(zhuǎn)錄抑制復(fù)合體,共同調(diào)控MaACO1和MaEXP2/7/8的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。酵母雙雜交（Y2H）、雙分子熒光互補(bǔ)（BiFC）和免疫共沉淀（Co-IP）的結(jié)果均說(shuō)明MaERF11與 MaHDA1之間存在相互作用關(guān)系，并且，MaHDA1具有HDAC保守域和組蛋白去乙?；?/p>

6、活性，可以增強(qiáng)MaERF11對(duì)下游靶基因MaACO1和MaEXP2/7/8的抑制作用。這些結(jié)果共同說(shuō)明，MaERF11與MaHDA1可以形成轉(zhuǎn)錄抑制復(fù)合體，共同調(diào)控后熟相關(guān)基因MaACO1和MaEXP2/7/8的表達(dá)，從而參與調(diào)控香蕉果實(shí)的后熟衰老過(guò)程。
　　4.從香蕉基因組序列中獲得了17個(gè)MaHDACs基因，可以分為RPD3/HDA1、HD2和SIR2三個(gè)不同亞族，并且它們?cè)谙憬豆麑?shí)后熟過(guò)程中呈現(xiàn)不同的表達(dá)模式。我們從香蕉基因

7、組中鑒別出17個(gè)MaHDACs基因，通過(guò)進(jìn)化樹(shù)關(guān)系和氨基酸序列保守域分析發(fā)現(xiàn)，其中的MaHDA1-12編碼的氨基酸序列都包含一個(gè)HDAC保守結(jié)構(gòu)域，屬于RPD3/HDA1亞家族；MaHDT1-3編碼的氨基酸序列在N端都有一個(gè)MEFWG保守域,屬于HD2亞家族；而MaSRT1/2編碼的氨基酸序列都有一個(gè)SIR2保守域，屬于SIR2亞家族。qRT-PCR分析結(jié)果顯示，17個(gè)MaHDACs在香蕉果實(shí)后熟進(jìn)程中呈現(xiàn)出不同的表達(dá)模式，其中，尤以M

8、aHDA6的表達(dá)變化最明顯，在三個(gè)不同處理的香蕉果實(shí)中均表現(xiàn)出明顯的上調(diào)趨勢(shì)。
　　5.探討了MaHDA6在乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和果實(shí)成熟中的調(diào)控機(jī)制。研究表明，MaHDA6定位于細(xì)胞核內(nèi)，具有組蛋白去乙?；富钚?，ChIP結(jié)果顯示，MaHDA6可以結(jié)合MaERF11/15的啟動(dòng)子，并且成熟香蕉果實(shí)的MaERF11/15基因染色質(zhì)上組蛋白乙酰化的水平低于未成熟的香蕉，這與它們的表達(dá)是一致的。這些結(jié)果說(shuō)明，MaHDA6可能通過(guò)去乙酰化作用來(lái)