1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察大麻素受體拮抗劑AM251干預(yù)后1型糖尿病腎病大鼠尿蛋白及足細(xì)胞裂隙膜蛋白nephrin和podocin的變化，探討CB1拮抗劑AM251對(duì)1型糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞病變的影響。
　　方法：(1)選擇40只健康雄性SD大鼠，體重200-250g，隨機(jī)分組:正常對(duì)照組(n=20)，和糖尿病腎病模型組(n=20)。糖尿病腎病模型組大鼠禁食12小時(shí)后給予1％鏈脲佐菌素(55 mg/kg)一次性腹腔注射，注射后72小時(shí)尾

2、靜脈取血測(cè)血糖，以血糖≥16.7mmol/l為糖尿病造模成功。造模成功后分別于第7、14、28天再次測(cè)血糖，仍符合上述標(biāo)準(zhǔn)者為穩(wěn)定成模的大鼠。大鼠成模穩(wěn)定后至少1月的時(shí)間測(cè)大鼠24小時(shí)尿蛋白，以24h尿蛋白≥30mg者為糖尿病腎病造模成功。成模者進(jìn)入后續(xù)實(shí)驗(yàn)，未成模者退出實(shí)驗(yàn)。正常組大鼠按體重隨機(jī)分為兩組:正常生理鹽水對(duì)照組（A組）和正常AM251干預(yù)組（B組）。糖尿病腎病成模組大鼠按體重隨機(jī)分為兩組:糖尿病腎病未治療組（C組）和糖尿病

3、腎病AM251干預(yù)組（D組）。從糖尿病腎病造模成功開(kāi)始起B(yǎng)組和D組大鼠每日按1 mg/kg給予AM251（溶于10％，二甲基亞砜溶液中），腹腔注射，連續(xù)12周，A組和C組以等體積的0.9％生理鹽水，腹腔注射，連續(xù)12周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)檢測(cè)各組大鼠24h尿蛋白、肌酐清除率、腎質(zhì)量/體質(zhì)量;HE染色觀察腎臟病理;透射電鏡觀察腎小球超微結(jié)構(gòu);免疫印跡法半定量測(cè)定CB1、nephrin、podocin蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)A組和B組2

4、4小時(shí)尿蛋白、肌酐清除率、腎質(zhì)量/體質(zhì)量、CB1受體蛋白、nephrin、podocin蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;腎臟病理示足細(xì)胞無(wú)明顯變化。(2)與A組相比，C組24小時(shí)尿蛋白、腎質(zhì)量/體質(zhì)量升高（P＜0.05）;肌酐清除率降低(P＜0.05);CB1受體蛋白表達(dá)增多(P＜0.05); nephrin、podocin蛋白表達(dá)減少(P＜0.05);腎臟足細(xì)胞數(shù)減少、足突寬度(FPW)增加并融合、腎小球基底膜(GBM)增厚

5、（P＜0.05）。(3)與A組比較，D組24小時(shí)尿蛋白、腎質(zhì)量/體質(zhì)量升高（P＜0.05）;肌酐清除率降低(P＜0.05);CB1受體蛋白表達(dá)增多（P＜0.05）;nephrin表達(dá)減低(P＜0.05)、podocin蛋白表達(dá)減低不明顯（P＞0.05）;足突融合率增加（P＜0.05）;足細(xì)胞個(gè)數(shù)減少、足突增寬及腎小球基底膜(GBM)增厚不明顯(P＞0.05)。(3)與C組相比，D組24小時(shí)尿蛋白、腎質(zhì)量/體質(zhì)量降低（P＜0.05）;肌酐