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文檔簡介
1、目的:通過檢測腦組織內(nèi)凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目及caspase-3蛋白量,探討B(tài)ax抑制肽對缺氧缺血腦損傷新生鼠抑制神經(jīng)細胞凋亡的作用及有效治療時間窗。
方法:選取7日齡Wister新生大鼠182只做為研究對象,隨機分為假手術(shù)組(n=14)、對照組(n=84)和實驗組(n=84)。對照組與實驗組通過結(jié)扎左側(cè)頸總動脈以及置于8%的氮氧混合氣中2小時建立缺氧缺血性腦損傷(hypoxia-ischemicbrain damage,H
2、IBD)模型,假手術(shù)組僅游離左側(cè)頸總動脈,不結(jié)扎不低氧處理。實驗組和對照組分別經(jīng)左側(cè)側(cè)腦室注射5ug Bax-抑制肽(5ul)和生理鹽水(5ul)。根據(jù)HIBD模型建立后注射Bax抑制肽和生理鹽水的時間不同,將實驗組和對照組分為0h、6h、12h、24h、48h、72h六個亞組(n=14)。假手術(shù)組不注射任何藥物。所有實驗動物均于HIBD模型建立后7天處死,進行腦組織病理檢測、TUNEL法檢測凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目、蛋白免疫印跡法檢測Ca
3、spase-3蛋白含量。
結(jié)果:①左側(cè)海馬區(qū)腦組織HE染色:與假手術(shù)組比較,實驗組和對照組腦組織病理損傷明顯。實驗組與對照組在0h、6h、12h、24h、48h亞組比較,病理損傷程度較輕,在72h亞組比較無明顯差異。②TUNEL染色左側(cè)海馬區(qū)腦組織凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目:實驗組與對照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較,凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在72h亞組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。實驗組的各亞組之
4、間依次比較,HIBD模型后越早注射Bax抑制肽,凋亡陽性神經(jīng)細胞數(shù)目越少,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義。③蛋白免疫印跡法檢測左側(cè)海馬區(qū)腦組織caspase-3蛋白含量:實驗組和對照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較,caspase-3含量明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在72h亞組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。實驗組各亞組之間依次比較,HIBD模型后越早注射Bax抑制肽,腦組織內(nèi)caspase-3含量越少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)論:①
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