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1、目的:研究大腸癌組織中EphA2與VEGF、MMP9蛋白表達(dá)的關(guān)系;探討EphA2對(duì)大腸癌細(xì)胞VEGF和MMP9蛋白表達(dá)的影響。 方法:免疫組化SP法檢測(cè)69例大腸癌組織及30例遠(yuǎn)癌腸粘膜組織中EphA2、VEGF和MMP9蛋白的表達(dá);Western blot驗(yàn)證選擇高表達(dá)EphA2蛋白的大腸癌細(xì)胞株HCTll6;利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)將EphA2 AsDON瞬時(shí)轉(zhuǎn)染入HCTll6細(xì)胞,Western blot檢測(cè)反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染
2、效率后,利用ELISA檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞上清液中VEGF蛋白的表達(dá);應(yīng)用明膠酶譜分析法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞上清液中明膠酶的分泌。 結(jié)果: 1、大腸癌組織中EphA2蛋白表達(dá)顯著高于遠(yuǎn)癌腸粘膜組織(P<0.01),且與Dukes分期、腫瘤組織分化程度及肉眼類型相關(guān)(P<0.05);VEGF蛋白在大腸癌中的表達(dá)顯著高于遠(yuǎn)癌腸粘膜組織(P<0.01),且與Dukes分期密切相關(guān)(P 3、癌腸粘膜組織(P
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