1、有機磷農藥的毒作用機理主要是抑制乙酰膽堿酯酶活性，使乙酰膽堿過度蓄積而引起一系列中毒癥狀。阿托品和膽堿酯酶復能劑的應用有力地證明了這點，但兩者對重度中毒所引起的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的療效并不完全，提示有機磷農藥引起的神經(jīng)系統(tǒng)中毒可能與非膽堿能機制有關。中樞抑制性氨基酸神經(jīng)遞質在抽搐發(fā)作、學習記憶等方面具有非常重要的作用，而且許多腦區(qū)內膽堿能體系和γ-氨基丁酸(GABA)體系存在交互作用。因此，在有機磷農藥中毒模型中觀察抑制性氨基酸神經(jīng)遞質系統(tǒng)的

2、變化并初步探討其可能機制，對闡明有機磷中毒的非膽堿能毒作用機制意義重大。 本課題研究了有機磷農藥樂果急性、亞慢性染毒對大鼠中樞GABA系統(tǒng)的影響。并通過正交實驗觀察增加中樞GABA含量(給予GABA轉氨酶抑制劑——氨基烯酸)對有機磷農藥急性中毒的保護效果。 SD大鼠單次經(jīng)口灌胃給予樂果，劑量分別為0(NS)，低劑量組(38.9 mg/kg)，中劑量組(83.7mg/kg)和高劑量組(180.0g/kg)，分別在染毒后第0

3、.5、2、8、24h斷頭處死，用高效液相色譜法(high-performance liquid chromatography，HPLC)法測定大鼠大腦皮質、海馬兩個腦區(qū)中抑制性氨基酸神經(jīng)遞質GABA、甘氨酸(Glycine，Gly)含量。海馬各劑量組GABA及Gly的含量與對照組(GABA:0.955±0.099μmol/g蛋白；Gly：0.849±0.216μmol/g蛋白)相比，都有不同程度增加，其中海馬低劑量組各時間段，中劑量組0

4、.5、2、8h，高劑量組0.5、24h GABA含量的增加與對照組相比都有統(tǒng)計學意義。Gly低劑量組在染毒8h,中劑量組0.5h,高劑量組0.5、24h的含量均升高，且差異有統(tǒng)計學意義。大腦皮質GABA及Gly含量與對照組(GABA:0.967±0.053μmol/g蛋白；Gly:0.840±0.213μmol/g蛋白)相比，均有所增加，但差異都沒有統(tǒng)計學意義。急性樂果染毒8h后，用放射性配體受體結合法(radioligand rece

5、ptor binding assay，RBA)測定大鼠大腦皮質GABA<,A>受體的最大結合容量(Maximum binding capacity,Bmax)和平衡解離常數(shù)(Equilibrium dissociation constant，Kd)，發(fā)現(xiàn)與對照組相比(Bmax=6.11±0.23pmol/mg，Kd=97.5±5.9 nmol/L)，各劑量組GABA<,A>受體的Bmax值的改變沒有統(tǒng)計學意義，而Kd值降低有統(tǒng)計學意義。

6、采用正交實驗，觀察能增加中樞GABA濃度的氨己烯酸(Vigabatrin，VGB)對樂果中毒的保護作用，發(fā)現(xiàn)其與阿托品連用可改善樂果中毒小鼠的癥狀，延長中毒小鼠的存活時間，并與阿托品有一定的協(xié)同治療作用。這些結果提示，樂果中毒后抑制性氨基酸遞質變化的復雜性，不同劑量、不同時程表現(xiàn)可能完全不同，反映了有機體功能的整體性和一定程度上的代償性。在大鼠90d實驗中，大鼠灌胃給予樂果，劑量分別為0(NS)，低劑量(5.0mg/kg)，中劑量(10

7、.0mg/kg)和高劑量組(20.0mg/kg)，每周染毒5天(次)，實驗周期90d。實驗期間，各染毒組動物全血AChE活性明顯抑制，實驗后期有所恢復。實驗結束時，低、中、高染毒組延髓AChE活性分別約為對照組的78％、63％、42％。與對照組(0.979±0.143 umol/g蛋白；0.845±0.220 umol/gprotein)相比，中、高劑量組大腦皮質GABA、Gly含量明顯降低(P<0.01)；而海馬GABA、Gly含量明

8、顯升高(P<0.01)。大腦皮質GABA<,A>受體的Bmax值低劑量組升高(P<0.05)，中劑量組降低(P<0.05)，各劑量組GABA<,A>受體的Kd值比對照組均有降低，且低、中劑量組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 本課題以樂果為有機磷農藥代表，研究了樂果急性和亞慢性染毒對大鼠中樞GABA系統(tǒng)的影響，為理解有機磷農藥中毒的非膽堿能毒作用機制提供了實驗基礎，闡明了接觸有機磷農藥引起的中樞GABA遞質通路的改變，認為抑制