1、膽管癌是一種肝內(nèi)或膽管上皮來源的惡性程度較高的腫瘤。由于其解剖和生理特點(diǎn)，早期診斷和臨床治療都較困難。多數(shù)患者出現(xiàn)癥狀時(shí)通常己經(jīng)進(jìn)入中晚期，已不適合手術(shù)切除。藥物治療對于不能手術(shù)切除的膽管癌患者具有重要意義。臨床上常用的抗腫瘤藥物多數(shù)具有較強(qiáng)的毒副作用，而且膽管癌對其不敏感，因此，尋找對膽管癌更敏感、有效的、毒副作用小的天然抗腫瘤藥物，提高膽管癌藥物治療的療效就變得更加重要。
　　七葉皂苷鈉為五環(huán)三萜皂苷鈉，是一種非甾體抗炎藥，具

2、有抗?jié)B出及增加靜脈張力、消腫、抗炎和改善血液循環(huán)等作用，已廣泛應(yīng)用于臨床。近年來，七葉皂苷鈉的抗腫瘤已得到重視并進(jìn)行了不同程度的研究，但有關(guān)七葉皂苷鈉抗膽管癌作用的研究很少。
　　本論文以體外培養(yǎng)的三株人膽管癌QBC939、Mz-Cha-1、Sk-Cha-1細(xì)胞為研究對象，分別探討了β-七葉皂苷鈉的抗腫瘤作用及作用機(jī)理。通過MTT法、細(xì)胞形態(tài)觀察法、染色法、流式細(xì)胞術(shù)、闡明了β-七葉皂苷鈉對膽管癌的增殖抑制、周期調(diào)控、誘導(dǎo)凋亡作用

3、;使用DNA Ladder、RT-PCR、Western blot等方法全面探索了β-七葉皂苷鈉誘導(dǎo)膽管癌凋亡可能的分子機(jī)制;并采用細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)研究了β-七葉皂苷鈉對膽管癌細(xì)胞體外遷移、侵襲能力的改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，β-七葉皂苷鈉對于體外培養(yǎng)的膽管癌細(xì)胞的增殖抑制作用呈時(shí)間和劑量依賴性，與臨床常用化療藥物5-Fu、VCR、CDDP相比，β-七葉皂苷鈉對膽管癌的抑制效果較強(qiáng)。Mz-Cha-1細(xì)胞周期被

4、阻滯在G0/G1期，而QBC939、Sk-Cha-1細(xì)胞周期被阻滯在G2/M期。β-七葉皂苷鈉能引起ROS活性升高，線粒體膜電位的崩潰，并且能夠激活Caspase-3的活性，引起膽管癌細(xì)胞的凋亡。該凋亡作用能夠被Caspase的廣譜抑制劑z-VAD-fmk抑制。抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)降低，Bax和p53表達(dá)不變，以及ROS活性升高在該凋亡過程中發(fā)揮了重要作用。同時(shí)，β-七葉皂苷鈉還可以抑制膽管癌細(xì)胞體外遷移和侵襲能力。總之，β-七葉皂