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文檔簡介
1、目的:探討高血糖對大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞色素-C(Cytochrome-C,Cyt-C)、半胱氨酸天門冬氨酸蛋白酶-3(cysteinylaspartate specificproteinase-3, caspase-3)表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討其加重腦缺血損傷的作用機(jī)制。
方法:30只雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠隨機(jī)分為三大組:高血糖組、正常血糖組、假手術(shù)組。按體質(zhì)量4g/kg給予大鼠尾
2、靜脈注射25%葡萄糖,造成大鼠高血糖狀態(tài);繼而采用改良大腦中動(dòng)脈阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。于缺血2h后再灌注24h采用Bederson評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行神經(jīng)功能評分、末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP口末端標(biāo)記技術(shù)(terminaldeoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end l
3、abeling assay,TUNEL)染色檢測凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)、免疫組織化學(xué)染色(immunohistochemistry,IHC)方法檢測鼠腦缺血再灌注皮質(zhì)區(qū)Cyt-C、caspases-3的表達(dá)情況,并以MiVnT顯微生物圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析。
結(jié)果:1,神經(jīng)功能評分:高血糖組神經(jīng)功能評分為(3.80±0.42)分,正常血糖組為(3.30±0.48)分,假手術(shù)組為(0.00±0.00)分,高血糖組及正常血糖組的神經(jīng)功
4、能評分較假手術(shù)組均顯著增高(P<0.01),而高血糖組較正常血糖組增加明顯(P<0.05)。2,神經(jīng)細(xì)胞凋亡計(jì)數(shù):高血糖組凋亡細(xì)胞數(shù)為(19.10±0.99)個(gè),正常血糖組為(17.50±1.08)個(gè),假手術(shù)組為(0.67±0.58)個(gè),高血糖組及正常血糖組的凋亡細(xì)胞數(shù)較假手術(shù)組明顯增多(P<0.01),且高血糖組較正常血糖組增多顯著(P<0.05)。3,Cyt-C和caspase-3表達(dá):高血糖組Cyt-C和caspase-3灰度值分
5、別為(106.70±1.77)、(107.20±1.69),正常血糖組分別為(113.10±1.52)、(115.10±1.20),假手術(shù)組分別為(147.67±3.21)、(147.67±1.53)。高血糖組及正常血糖組的Cyt-C和caspase-3表達(dá)水平均較假手術(shù)組顯著增強(qiáng)(P<0.01),且高血糖組比較正常血糖組增強(qiáng)明顯(P<0.05)。
結(jié)論:Cyt-C、caspase-3的激活及表達(dá)增強(qiáng),可能是高血糖加重腦缺
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