1、目的：
　　研究血友病 A患者的分子發(fā)病機(jī)制，以期在基因或表觀遺傳學(xué)層面找到新的基因缺陷類型或分子機(jī)制，從而進(jìn)一步揭示其臨床表現(xiàn)異質(zhì)性的原因，為血友病A的治療尋找新的切入點(diǎn)。
　　方法：
　　隨機(jī)抽取重慶地區(qū)已確診血友病A患者24例，對(duì)所有病人通過當(dāng)面詢問、反復(fù)電話隨訪及病例資料回顧獲取臨床表型及實(shí)驗(yàn)室資料，取其血樣用長(zhǎng)距離PCR及雙管多重PCR分別進(jìn)行內(nèi)含子1及內(nèi)含子22倒位檢測(cè)、高通量測(cè)序分析 FⅧ基因全外顯子突變

2、情況、質(zhì)譜甲基化檢測(cè)方式進(jìn)行啟動(dòng)子區(qū) CpG島甲基化情況分析（加入正常對(duì)照）。所有突變通過Pumbmed、UCSC、FactorⅧ Variant Database檢索明確是否為已報(bào)到突變或者是目前新發(fā)現(xiàn)突變，并結(jié)合倒位檢測(cè)結(jié)果分析患者病情；而所選病例的甲基化檢測(cè)結(jié)果則與正常對(duì)照組進(jìn)行比較，尋找其表觀遺傳學(xué)修飾差異。
　　結(jié)果：
　　1．24例病人年齡分布在2歲到48歲，多以關(guān)節(jié)出血為主要表現(xiàn)，其中重型13例（54.1％）、

3、中間型9例（37.5%），中-重型1例（4.2%）（輸注新鮮冰凍血漿后測(cè)FⅧ：C為8.6%），輕型1例（4.2%）；所有病人臨床表現(xiàn)與嚴(yán)重程度分型基本符合。
　　2.因?yàn)闃?biāo)本采集后部分血樣 DNA濃度不足，24例標(biāo)本共有18例進(jìn)行了倒位檢測(cè)，其中有7例檢測(cè)出了22號(hào)內(nèi)含子倒位，約占檢測(cè)者中38.9%，未檢測(cè)出1號(hào)內(nèi)含子倒位患者。
　　3.24例病人中FⅧ基因外顯子測(cè)序有7例未檢測(cè)出突變。余17例病人共檢測(cè)出突變21個(gè)（15種

4、），與Pumbmed、UCSC、FactorⅧVariant Database進(jìn)行對(duì)比后發(fā)現(xiàn)有10種突變?yōu)樾掳l(fā)現(xiàn)突變。
　　4.對(duì)照組與所選擇輕型及重型病例組對(duì)比，啟動(dòng)子區(qū) CpG島甲基化程度在病例與對(duì)照之間或輕型及重型病例之間并無顯著差異。
　　結(jié)論：
　　血友病 A患者以關(guān)節(jié)出血為主要表現(xiàn)，臨床上重型較多見；其基因結(jié)構(gòu)龐大，造成FⅧ基因重大改變的如倒位、終止突變等多導(dǎo)致重型臨床表型，但其基因缺陷類型種類繁多，目前所