1、甜葉菊為菊科甜菊屬多年生草本植物。其中含有豐富的甜菊苷類和黃酮類成分，前者在食品和醫(yī)藥行業(yè)具有良好的應(yīng)用前景，而后者又具有良好的藥理作用。為了充分利用該資源，本論文從甜葉菊有效部位的制備工藝考察、化學(xué)成分的分離鑒定和質(zhì)量控制方法的建立三方面展開對(duì)甜葉菊的全面研究。 第一部分文獻(xiàn)綜述對(duì)甜葉菊的化學(xué)成分，生物活性及開發(fā)利用進(jìn)行了全面綜述。 第二部分實(shí)驗(yàn)研究 第一章甜葉菊有效部位制備工藝研究 1.建立了甜葉菊(

2、甜菊苷類+黃酮類)有效部位的制備工藝。 采用L9(3<'4>)正交實(shí)驗(yàn)，以可見分光光度法測(cè)定總黃酮的含量，以高效液相色譜法分別測(cè)定槲皮苷和甜菊苷的含量，對(duì)甜葉菊的提取工藝進(jìn)行考察。綜合分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定甜葉菊(甜菊苷類+黃酮類)有效部位最佳提取工藝為A<,2>％乙醇提取B<,3>次，每次提取C<,1>小時(shí)，溶劑用量為D<,3>倍量。通過對(duì)5種不同極性大孔吸附樹脂的篩選，確定C型大孔吸附樹脂對(duì)總黃酮和指標(biāo)性成分甜菊苷和槲皮苷具有較

3、好的富集純化性能。其最佳工藝為選用C型樹脂：上樣濃度為C<,4>；上樣量和樹脂體積比為E<,2>；樹脂柱徑高比為L(zhǎng)<,2>；吸附流速為D<,1>；水洗體積為B<,1>；洗脫流速為F<,1>；洗脫溶劑為S％乙醇；洗脫體積為WBV；樹脂可重復(fù)使用7次。 2.建立了甜葉菊(黃酮類)和甜葉菊(甜菊苷類)兩個(gè)有效部位的綜合制備工藝 本工藝?yán)镁埘０穼?duì)具有酚羥基的成分的特異吸附性能，同時(shí)富集甜葉菊中的黃酮類成分和甜菊昔類成分，確定了

4、聚酰胺水洗得甜葉菊(甜菊苷類)有效部位，同時(shí)醇洗得甜葉菊(黃酮類)有效部位的制備工藝。確定聚酰胺最佳工藝為：上樣濃度為C<,2>；上樣量和聚酰胺體積比為E<,1>；柱床徑高比為L(zhǎng)<,2>；吸附流速為D<,1>；水洗體積為B<,1>；洗脫流速為F<,1>；洗脫溶劑為P％乙醇；洗脫體積為MBV；聚酰胺可重復(fù)使用5次。 第二章甜葉菊(甜菊苷類+黃酮類)有效部位化學(xué)成分研究 采用多種分離純化方法(正相硅膠柱層析；聚酰胺，Toyo

5、pearlHW-40，Pharmadex LH-20，反相RP-18柱層析，以及重結(jié)晶等方法)和結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)(如UV、IR、FAB-MS、<'1>HNMR、<'13>CNMR、DEPT、HMQC、HMBC、<'1>H-XHCOSY等波譜學(xué)技術(shù)和化學(xué)方法對(duì)甜葉菊(甜菊苷類+黃酮類)有效部位化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究，共分離鑒定出12個(gè)化合物。其中黃酮7個(gè)：木犀草素，槲皮素，木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷，芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷，槲

6、皮苷，槲皮素-3-O-β-D-阿拉伯糖苷，槲皮素-3-O-[4-O-反式-咖啡?；?α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-半乳糖苷]；鞣質(zhì)1個(gè)：4,5-雙咖啡?？鼘幩?；甾類2個(gè)：β-谷甾醇，△5，22豆甾二烯醇；萜類2個(gè)：甜菊苷，萊鮑迪苷.A。其中，木犀草素和4，5-雙咖啡酰奎寧酸2個(gè)化合物為首次從甜葉菊中分離得到，槲皮素-3-O-[4-O-反式-咖啡?；?α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-半乳糖苷]為1新黃酮類化合物。 第三章

7、甜葉菊有效部位質(zhì)量控制方法研究建立了甜葉菊有效部位質(zhì)量控制方法體系 1.建立了甜葉菊有效部位的總黃酮含量測(cè)定方法。以槲皮苷為指標(biāo)性成分分析，采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉顯色的可見分光光度法測(cè)定，甜葉菊(甜菊苷類+黃酮類)有效部位的總黃酮含量為36.69％，RSD=1.53％；甜葉菊(黃酮類)有效部位的總黃酮含量為85.52％，RSD=0.69％。 2.建立了甜葉菊有效部位的4個(gè)指標(biāo)性成分含量同時(shí)測(cè)定的方法。運(yùn)用RP-H

8、PLC梯度洗脫法，對(duì)甜葉菊有效部位中的木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮苷，4,5-雙咖啡?？鼘幩?，槲皮素-3-O-[4-O-反式-咖啡?；?α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-半乳糖苷]四個(gè)指標(biāo)性成分的含量進(jìn)行了測(cè)定。 3.建立了甜葉菊有效部位的2個(gè)指標(biāo)性成分含量同時(shí)測(cè)定方法。運(yùn)用氨基柱高效液相色譜法，對(duì)甜葉菊有效部位中的甜菊苷，萊鮑迪苷A的含量進(jìn)行了測(cè)定。經(jīng)測(cè)定，甜葉菊(甜菊苷類+黃酮類)有效部位中甜菊苷含量為34.9

9、8％，RSD=1.92‰萊鮑迪苷A含量為10.20％，RSD=1.98％。甜葉菊(甜菊苷類)有效部位中甜菊苷含量為38.85％，RSD=0.63％；萊鮑迪苷A含量為16.91％，RSD=0.99％。 4.建立了甜葉菊有效部位的特征表達(dá)方法。運(yùn)用氨基柱對(duì)甜葉菊有效部位的特征進(jìn)行了指紋圖譜表達(dá)，并采用添加對(duì)照品的方法對(duì)甜葉菊有效部位中的10個(gè)主要色譜峰進(jìn)行了指認(rèn)。 第三部分總結(jié)與討論 1．對(duì)研究結(jié)果進(jìn)行了總結(jié)。

10、 2．闡明了本論文的主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn) 首次建立了甜葉菊有效部位Ⅰ(甜菊苷類+黃酮類)和甜葉菊有效部位Ⅱ(黃酮類)及甜葉菊有效部位Ⅲ(甜菊苷類)的三個(gè)制備工藝。 闡明了甜葉菊有效部位的主要化學(xué)成分。從甜葉菊有效部位中分離并鑒定了12個(gè)化合物，其中木犀草素和4，5-雙咖啡?？鼘幩?個(gè)化合物為首次從甜葉菊中分離得到，槲皮素-3-O-[4-O-反式-咖啡?；?α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-半乳糖苷]為1新黃酮類化合物。