1、隨著我國水產養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大和集約化水平的提高，各種水產養(yǎng)殖動物病害的發(fā)生日益頻繁，危害也越來越嚴重，已成為制約整個水產養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的最重要的因素之一。近年來，尋求水產動物病害的有效防治方法越來越受到國內外學者的廣泛關注，其中水產養(yǎng)殖動物病原的快速、準確檢測是對水產動物病害進行有效防治的基礎和先決條件。因此，建立水產養(yǎng)殖動物病原的快速、準確檢測方法和水產動物疾病的快速診斷技術不僅能直接用于水產動物病害的有效防治，還將為水產養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)

2、健康發(fā)展奠定良好基礎。為此，本論文對四種水產病原性弧菌的種內高度保守的gyrB基因進行了克隆，為建立這些病原的快速診斷方法奠定了可靠前期基礎；本論文還對其中的溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)研制了PCR快速檢測試劑盒。具體內容如下： 1、采用SDS裂解法提取了河流弧菌(Vibrio．fluvialis)、溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)、鰻弧菌(Vibrio anguillarum)、擬態(tài)弧菌

3、(Vibrio mimicus)共四種水產病原性弧菌的基因組DNA；利用gyrB基因的通用引物對以上四種弧菌的基因組DNA進行PCR擴增，結果均得到了長度為1200bp左右的目的片斷，通過凝膠回收并轉化感受態(tài)E.coli，經藍白斑篩選后獲得陽性克隆，經測序后獲得了相應的DNA序列信息。 2、由于溶藻弧菌是危害我國南方海水養(yǎng)殖業(yè)最嚴重的病原性細菌之一。因而，本論文根據溶藻弧菌的gyrB基因序列，設計了一對特異性引物，對2個溶藻弧菌

4、標準株和其它10種細菌性病原進行了PCR擴增，結果表明，只有兩株溶藻弧菌菌株在372bp處有一條陽性條帶，而其它的10個菌株均無條帶產生，因此，本論文已成功研制出了溶藻弧菌的PCR快速檢測試劑盒，可以為水產動物與人類的溶藻弧菌病和海產品的食品安全提供快速、準確的診斷方法和檢測技術。此外，我們利用此試劑盒對海南地區(qū)的生活區(qū)附近海水、水產動物養(yǎng)殖健康區(qū)海水和發(fā)病區(qū)海水進行了溶藻弧菌存在情況的調查，結果顯示，生活區(qū)附近海水的溶藻弧菌數明顯低于