1、眾所周知，2型糖尿病與胰島素抵抗已成為嚴重威脅著人們健康的主要疾病之一。目前從天然藥物中挖掘和尋找新的針對胰島素抵抗和2型糖尿病的藥物已成為國內(nèi)外的研究熱點。大黃素，化學名稱為6-甲基-1，3，8-三羥基蒽醌，英文名稱為Emodin，是從大黃屬、蓼屬、鼠李屬和番瀉葉等中藥中分離得到的活性成分。大黃素具有廣泛的藥理作用。本研究組前期工作發(fā)現(xiàn)大黃素能明顯促進脂肪細胞的分化，是PPARγ的激動劑。脂肪組織和骨骼肌組織是胰島素敏感的主要外周組織

2、，因此本研究應用3T3-L1前脂肪細胞和C2C12成纖維細胞模型來觀察大黃素對脂肪細胞和骨骼肌細胞糖代謝的影響。 目的：培養(yǎng)3T3-L1脂肪細胞和C2C12骨骼肌細胞，觀察大黃素對脂肪細胞和骨骼肌細胞糖代謝的影響，并對其分子機制進行探討，找到藥物作用的靶分子和靶基因及相互的作用關系，探尋大黃素調(diào)節(jié)糖代謝的細胞和分子機制，期望能為防治2型糖尿病和胰島素抵抗的新藥物開發(fā)提供一些實驗依據(jù)。 方法： 在分化成熟的3T3-L1脂肪

3、細胞和C2C12肌細胞中加入不同濃度大黃素孵育不同時間后，進行3H-葡萄糖轉(zhuǎn)運測定，觀察大黃素對基礎和胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運的影響。用PI3K、PKC、MAPK和AICAR等信號蛋白和藥物的化學抑制劑、蛋白免疫印跡檢測AKT、AMPK和ACC的磷酸化激活，觀察大黃素對脂肪細胞的信號蛋白活性的影響。用定量PCR和蛋白免疫印跡等觀察大黃素對GLUT1和GLUT4表達的影響。用EMSA方法檢測大黃素對NF-КB活性的影響。 結果： 1

4、）在誘導分化成熟的脂肪細胞中，大黃素明顯促進基礎和胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運，呈量效關系。50μM濃度大黃素孵育4小時使基礎葡萄糖轉(zhuǎn)運增加200％，6.25μM大黃素孵育4小時使胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運增加138％，2）在誘導分化成熟的C2C12骨骼肌細胞中，大黃素明顯促進其基礎葡萄糖轉(zhuǎn)運，亦呈量效關系。25μM濃度大黃素孵育24小時使基礎葡萄糖轉(zhuǎn)運增加61％。3）PI3K抑制劑Wortmannin能夠部分抑制大黃素所致的基礎和胰島素刺激的葡

5、萄糖轉(zhuǎn)運，但用PKC和MAPK抑制劑抑制PKC和MAPK活性后，大黃素促進葡萄糖轉(zhuǎn)運的作用沒有顯著變化。另外，AICAR抑制劑Compound.c也不能抑制大黃素所致的骨骼肌細胞基礎葡萄糖轉(zhuǎn)運。4）大黃素促進脂肪細胞和骨骼肌的GLUT1和GLUT4的表達增加，同時大黃素可以激活AMPK和ACC，但不激活AKT。5）大黃素能部分改善TNF-α所致的脂肪細胞胰島素抵抗，而且能抑制NF-КB的活性。 結論：大黃素通過激活細胞內(nèi)的AMP