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1、中南大學博士學位論文不同生長期晶狀體蛋白對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞存活的促進作用及機制研究姓名:王文軍申請學位級別:博士專業(yè):眼科學指導教師:唐羅生20080501博+ 學位論文 中文摘要生長期晶狀體蛋白對體外培養(yǎng)R G C s 的存活和突起生長的促進作用是否存在差異。然后應用雙向凝膠電泳技術比較不同生長期晶狀體可溶性蛋白的電泳譜,尋找變化顯著的蛋白質點進行質譜分析,進而推導出發(fā)揮神經(jīng)保護作用的晶狀體蛋白確切成分。為視神經(jīng)損傷和再生的基礎研
2、究提供理論依據(jù),為臨床治療視神經(jīng)損傷探索可行方法。方法:l 建立S D 大鼠R G C s 體外培養(yǎng)模型及鑒定技術。2 提取l d 、2 w 、6 m 、l y e a r 生長期的大鼠晶狀體可溶性蛋白,分別將不同生長期的晶狀體可溶性蛋白加入基礎培養(yǎng)液中對R G C s 進行體外培養(yǎng),觀察R G C s 在體外存活的時間,測量培養(yǎng)l 、3 、5 、7 、9 d 時R G C s 的最長突起長度、細胞活性及細胞凋亡百分率,并進行組間比較。
3、3 分別對不同生長期的晶狀體可溶性蛋白進行雙向凝膠電泳,用圖像分析軟件對各組得到的電泳圖譜進行對比、分析。從分析結果中選取上調最為顯著的部分蛋白質點,利用質譜鑒定技術鑒定選取的蛋白質點,明確其成分。結果:l 成功建立S D 大鼠體外培養(yǎng)R G C s 模型,體外培養(yǎng)的R G C s 具有3 種主要形態(tài),存活時間在7 ~1 0 d 。使用抗大鼠T h y l .1 單克隆抗體可以鑒定體外培養(yǎng)的R G C s 。2 不同生長期晶狀體可溶性蛋
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