1、特發(fā)性肺纖維化患者肺泡灌洗液及血清中自細胞介素4、12水平變化的意義 間質(zhì)性肺疾病的發(fā)病率不斷增高，已經(jīng)成為威脅人類健康的一重要疾病。特發(fā)性肺纖維化(IPF)是間質(zhì)性肺疾病中較為重要的一種，肺纖維化發(fā)病機制目前尚未完全明確，越來越多的研究表明細胞因子，特別是致炎性因子可能在本病的發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用?，F(xiàn)在已有20余種細胞因子被證明與IPF有關。白細胞介素是其中較為重要的能作用于多種靶細胞的炎癥性單核細胞因子。白細胞

2、介素4(IL-4)、白細胞介素12(IL-12)分屬于兩個不同類型的細胞因子。Th1型細胞因子與Th2型細胞因子的比例失衡在肺纖維化中的作用越來越為人們所重視。本研究的目的就是探討IL-4、IL-12在IPF進程中所起的作用和它們的臨床意義，以期待對IPF的發(fā)病機制有更全面的認識。 實驗材料 研究對象：(1)IPF組：IPF患者30名，所有患者均經(jīng)臨床、肺功能檢查、血氣分析、肺HRCT檢查，并經(jīng)支氣管肺泡灌洗檢查(BAL

3、)和經(jīng)支氣管肺活檢(TBLB)除外其他間質(zhì)性肺疾病。符合美國胸科學會(ATS)和歐洲呼吸學會(ERS)共同提出的有關IPF的非創(chuàng)傷性標準．所有患者檢查前未經(jīng)糖皮質(zhì)激素及其它免疫抑制劑治療。(2)對照組：健康非吸煙的自愿獻血者30名做為血清對照組。以胸痛為自覺癥狀來我院要求進行纖維支氣管鏡檢查患者9名，經(jīng)肺功能、肺HRCT和纖維支氣管鏡檢查未見異常的健康者，作為BALF對照組。 實驗儀器：Olympus 260型纖維支氣管鏡，Un

4、iversal 32R離心機，BIO-RAD酶標儀。實驗試劑：IL-4和IL-12試劑盒均購自武漢博士德生物醫(yī)學公司。 實驗方法 1．應用Olympus 260型內(nèi)徑5.9mm的電子支氣管鏡做支氣管肺泡灌洗。 2．BALF用12目的無菌紗布過濾后注入經(jīng)高壓消毒的塑料離心管中，離心后注入無菌透析袋，浸入50％的聚乙二醇溶液中，24小時后加人生理鹽水(量為原BALF量的1/10)，取濃縮液封蓋冷凍保存(-20℃)備

5、用。于支氣管肺泡灌洗后立即采肘靜脈血3ml，對靜脈血進行離心，取上清冷凍保存(-20℃)備用。檢測時取其上清進行IL-4和IL-12水平測定。 3．用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清和BALF中IL-4和IL-12水平。 4．統(tǒng)計學處理：所得數(shù)據(jù)以±s表示，采用spss軟件包行t檢驗。實驗結果 1．IPF組與對照組BALF及血清中IL-4、IL-12的水平及比較 IPF組患者BALF中IL-4水平高于BALF對照

6、組，IL-12水平低于對照組；IPF組血清IL-4水平高于血清對照組，IL-12水平與血清對照組相比差異無顯著性。 2．IPF組患者血清和BALF中IL-4、IL-12水平的比較 IPF組患者BALF中IL-4水平與血清相比差異無顯著性；IL-12水平低于血清。 雖然引起IPF的發(fā)病機理目前尚未完全明確，但是近來研究人員對IPF的發(fā)病機制已有了越來越深人和廣泛的解。研究表明，在某種致病因素的作用下，細胞因子特別是

7、致炎性因子可能在本病的發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用?，F(xiàn)在已有20余種細胞因子被證明與IPF有關。白細胞介素是其中較為重要的能作用于多種靶細胞的炎癥性單核細胞因子。IL-4是特征性Th2型細胞因子，IL-12為重要的Thl型細胞因子。Thl型細胞與Th2型細胞的比例失衡在肺纖維化中的作用越來越為人們所重視。 研究表明，Th2細胞來源的因子如IL-4等可擴大炎癥反應引起肺結構重塑，刺激肺成纖維細胞增生伴膠原和纖維素沉積增多引起

8、肺泡壁基底膜增厚和彌漫性上皮下纖維化。研究發(fā)現(xiàn)，損傷的肺泡上皮細胞高表達IL-4，IL-4是成纖維細胞的趨化因子，誘導成纖維細胞增殖并增加細胞外膠原生成，且通過抗凋亡作用促進纖維化。 我們的研究結果顯示：LPF患者的BALF與血清中IL-4水平高于正常人(PO.05)。說明IL-4的增高是一種全身行為。目前認為,Ih2型細胞因子增多可以導致肺纖維化，本

9、試驗結果支持這一觀點。 IL-12主要由活化的巨噬細胞、樹突狀細胞和中性粒細胞產(chǎn)生，有致炎和免疫調(diào)節(jié)作用。在Th細胞亞群的分化中發(fā)揮重要作用，是Thl細胞生長所必需的細胞因子，可以促使Thl細胞的增殖分化產(chǎn)生Thl型細胞因子，抑制Th2細胞的增殖分化。IL-12可以誘導活化的T細胞和NK細胞分泌IFN-γ和TNF。 通過本試驗觀察IPF患者血清中IL-12水平與正常人血清中IL-12的水平無明顯差異(P>O.05

10、)，而BALF中的IL-12水平明顯低于正常人(P