1、目的用丙基硫氧嘧啶(6-n-propyl-2-thiouracil,PTU)1mg/100g體重連續(xù)向成年雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射,建立成年期甲狀腺功能減退癥(簡(jiǎn)稱甲減)動(dòng)物模型,觀察成年期甲減大鼠前額葉皮質(zhì)內(nèi)突觸前膜蛋白Syntaxin-1的表達(dá)水平及甲狀腺素替代治療后的恢復(fù)狀況,探討甲減腦損傷及恢復(fù)的分子機(jī)制。
　　方法普通級(jí)健康3月齡成年SD雄性大鼠隨機(jī)分為:(1)甲減組(PTU組)大鼠每日腹腔注射PTU

2、1mg/100g體重(BW);(2)常規(guī)劑量T4替代治療組(PTU+5-T4組)大鼠每日腹腔注射PTU1mg/100g體重(BW),四周后每日給予左旋T45mg/100g體重(BW),連續(xù)兩周;(3)大劑量T4替代治療組(PTU+20-T4組)大鼠每日腹腔注射PTU1mg/100g體重(BW),四周后每日給予左旋T420mg/100g體重(BW),連續(xù)兩周;(4)正常對(duì)照組(Control組)大鼠每日腹腔注射等體積生理鹽水。每周測(cè)體重一

3、次,并根據(jù)體重調(diào)整給藥劑量。造模六周結(jié)束后,腹主動(dòng)脈采血,取腦,應(yīng)用放射免疫法檢測(cè)大鼠血清T3、T4水平,超敏S-P法行免疫組織化學(xué)檢測(cè),80i正置研究型生物光學(xué)顯微鏡拍攝前額葉Ⅰ層(分子層)、Ⅱ?qū)?外顆粒層)、Ⅲ層(外椎體細(xì)胞層)、Ⅳ層(內(nèi)顆粒層)、Ⅴ層(內(nèi)椎體細(xì)胞層),JD-801形態(tài)學(xué)生物圖像分析系統(tǒng)對(duì)前額葉Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ層的Syntaxin-1的免疫反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行光密度值分析,以平均光密度(averageopticaldens

4、ity,AOD)作為觀察指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(x±s)表示。采用單因素方差分析(ANOVA),進(jìn)一步用LSD法進(jìn)行多重比較(least-significantdifferenceforposthocanalysis)。所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。P<0.05為差異有顯著性。
　　結(jié)果
　　1.體重變化造模前各組大鼠體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(282.08±36.47,288.55±39.67,288.55±39

5、.67,288.78±31.74)。造模結(jié)束后,正常對(duì)照組大鼠的體重較造模前增長(zhǎng)49％(284.09±40.11,423.73±57.82),甲減組大鼠增長(zhǎng)21.5%(282.08±36.47,342.75±35.34),小劑量T4替代治療組和大劑量T4替代治療組大鼠體重分別增長(zhǎng)32.5%(288.55±39.67,382.75±32.72)、26.1%(288.78±31.74,364.11±37.14)(與正常對(duì)照組比較,P<0.0

6、5)。
　　2.血清T3、T4水平與正常對(duì)照組相比,甲減組大鼠血清T3、T4水平明顯降低(P<0.05);常規(guī)劑量T4替代治療組大鼠血清T3、T4恢復(fù)至正常水平;大劑量T4替代治療組大鼠血清T3、T4水平顯著高于小劑量T4替代治療組和正常對(duì)照組(P<0.01)。3.Syntaxin-1蛋白在各組大鼠額葉Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ層各層內(nèi)表達(dá)量的變化免疫組化檢測(cè):Syntaxin-1免疫反應(yīng)產(chǎn)物在四組大鼠前額葉Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ層中分布是相

7、似的,陽(yáng)性顆粒(棕黃色顆粒)在各層中均廣泛表達(dá),但密度不同。量化分析結(jié)果顯示:Syntaxin-1在甲減組大鼠前額葉Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ層內(nèi)較正常對(duì)照組均顯著減少(P<0.05);小劑量T4替代治療組,Syntaxin-1與正常對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Ps>0.01);大劑量T4替代治療組,Syntaxin-1在大鼠前額葉五層內(nèi)均與正常對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Ps>0.01)。
　　結(jié)論(1)甲減可致成年期大鼠前額葉內(nèi)Syntaxin-1蛋