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1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文幾種因子對HaCaT細(xì)胞合成結(jié)合珠蛋白影響的研究姓名:夏立新申請學(xué)位級別:博士專業(yè):皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師:陳洪鐸20050401幾種因子對HaCaT細(xì)胞合成結(jié)合珠蛋白影響的研究目的在基因及蛋自質(zhì)水平上研究白細(xì)胞介素一6,白細(xì)胞介素一4對人角質(zhì)形成細(xì)胞:HaCaT細(xì)胞合成結(jié)合珠蛋白的影響。探討腫瘤壞死因子儀及干擾素1對HaCaT細(xì)胞合成結(jié)合珠蛋白的影響。探討免疫抑制劑地塞米松及甲氨喋呤對HaCaT細(xì)胞合成結(jié)合珠蛋
2、白的影響。材料和方法1細(xì)胞培養(yǎng)將HaCaT細(xì)胞接種于六孔板內(nèi),在含有t0%胎牛血清(fetalcalfBenim,F(xiàn)CS),lmM丙酮酸鹽,2raM谷氨酰胺,青霉素(1001xg/mL),鏈霉素(100pg/mL)的1640培養(yǎng)液中,5%CO:,37℃條件下培養(yǎng)。細(xì)胞形成單層后加入含有不同刺激因子的,含有或不含l斗M地塞米松的,不含有胎牛血清的1640培養(yǎng)液。所用刺激因子如下:白細(xì)胞介素一6(interleukin一6,50ng/mL)
3、,白細(xì)胞介素一4(interleukin一4,20ng/mL),腫瘤壞死因子q(tumornecrosisfactor旺,20ng/mL),干擾素1(interferon1,20ng/m1),地塞米松(dexamethasone,10斗M,IOOI山M,10001上M)及甲氨喋呤(methotrexate,50ng/ml,500ng/ml,5000ng/m1)。分別作用12,24,48小時后,收集細(xì)胞及細(xì)胞上清,用于結(jié)合珠蛋白(Hapt
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