GPX3基因甲基化在白血病發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:谷胱甘肽過氧化物酶3(Glutathione Peroxidase3,GPX3)基因在很多腫瘤細(xì)胞中啟動子區(qū)域異常甲基化而低表達(dá),但 GPX3基因甲基化在白血病細(xì)胞中的相關(guān)研究甚少。本研究探討 GPX3基因甲基化在白血病發(fā)生發(fā)展中可能的作用。
  方法:將4種白血病細(xì)胞株CCRF-CEM、Molt-4、HL-60、THP-1進(jìn)行體外培養(yǎng),通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶連反應(yīng)及甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)觀察 GPX3的信使RNA(mRNA)的

2、表達(dá)和甲基化程度,用免疫細(xì)胞化學(xué)染色方法對四種白血病細(xì)胞進(jìn)行染色,觀察GPX3蛋白表達(dá)情況。將四種細(xì)胞株各自分為對照組、單用去甲基化藥物組(5-氮雜-2'-脫氧胞苷,5-aza-dc)、單用組氨酸去乙?;敢种苿┙M和聯(lián)合用藥組(曲古抑菌素 A,TSA),利用定量實時聚合酶鏈反應(yīng)比較各組的GPX3表達(dá)水平。抑制THP-1細(xì)胞的GPX3基因表達(dá),觀察白血病細(xì)胞增殖與克隆能力的變化。
  結(jié)果:在4種白血病細(xì)胞株中,GPX3的mRNA及

3、蛋白表達(dá)水平均低。GPX3基因在白血病細(xì)胞株中處于完全甲基化或部分甲基化狀態(tài)。單用去甲基化藥物組的GPX3基因的表達(dá)水平明顯高于對照組(P<0.01);單用組氨酸去乙酰化酶抑制劑組的GPX3基因的表達(dá)水平則與對照組無明顯差異,其差異無統(tǒng)計學(xué)意義。用短發(fā)夾RNA轉(zhuǎn)染法抑制THP-1的GPX3基因表達(dá),可使THP-1細(xì)胞的增殖與克隆能力明顯高于對照組(Mock組),其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。
  結(jié)論:在白血病細(xì)胞中,G

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