1、中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所博士學(xué)位論文MTAP在人BEP2D細(xì)胞輻射致癌模型和非小細(xì)胞肺癌中的缺失和表達(dá)研究姓名：李邦印申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：衛(wèi)生毒理學(xué)指導(dǎo)教師：吳德昌20030601軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生毒理學(xué)專(zhuān)業(yè)博士學(xué)位論文2003年6月MTAP在人BEP2D細(xì)胞輻射致癌模型和非小細(xì)胞肺癌中的缺失與表達(dá)研究摘要在自然環(huán)境中，天然輻射的50％來(lái)自于氡及其子體放射出來(lái)的a粒子，高水平的氡及其子體是誘發(fā)原發(fā)性肺癌的重要因素之

2、一。對(duì)此，盡管人們已有深刻認(rèn)識(shí)，但是時(shí)至今日氡及其子體誘發(fā)肺癌的分子機(jī)理仍未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)室采用人支氣管上皮細(xì)胞BEP2D建立了a粒子輻射致惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞模型，照射后第35代細(xì)胞接種于裸鼠皮下可形成高分化的鱗癌，繼續(xù)分離培養(yǎng)獲得了BERP35T1BERP35T6多株惡性轉(zhuǎn)化的單克隆細(xì)胞，在國(guó)內(nèi)率先開(kāi)展了輻射致肺癌機(jī)制的研究。蛋白質(zhì)組水平的研究發(fā)現(xiàn)，BEP2D永生化細(xì)胞和BERP35惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞中有多種蛋白質(zhì)存在表達(dá)差異，其中MTAP、

3、HMG1在惡轉(zhuǎn)細(xì)胞中表達(dá)降低，而Maspin在癌前階段表達(dá)下降。在此基礎(chǔ)上，我們以BEP2D細(xì)胞為對(duì)照，通過(guò)雙向電泳技術(shù)對(duì)惡性程度更高的BERP35T2細(xì)胞進(jìn)行分析，并通過(guò)Northern雜交發(fā)現(xiàn)在BERP35T2中MTAP的mRNA表達(dá)水平比BEP2D細(xì)胞中降低5倍以上。MTAP(MethylthioadenosinePhosphorylase，甲硫腺苷磷酸化酶)，是甲硫氨酸和嘌呤合成補(bǔ)救途徑的第一個(gè)酶，專(zhuān)門(mén)司職催化多胺代謝的副產(chǎn)物M

4、TA(Methylthioadenosine，甲硫腺苷)，使之生成腺嘌呤和甲硫核糖一1磷酸(5methylthioDribose1_phosphate，MTR1P)，_最后形成ATP、dAMP和甲硫氨酸，分別參與細(xì)胞的能量合成、DNA合成和蛋白質(zhì)合成。MTAP催化的是可逆反應(yīng)，在正常細(xì)胞中有非常重要的作用。關(guān)于MTAP基因在肺癌或BEP2D輻射致癌細(xì)胞模型中的研究，在國(guó)內(nèi)并無(wú)相關(guān)報(bào)道，這促使我們圍繞MTAP基因組及其鄰近基因(組)結(jié)構(gòu)在