細(xì)胞芯片法在急性白血病骨髓樣本免疫分型中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的
  白血病是導(dǎo)致惡性腫瘤死亡的主要疾病之一,其中急性白血病占35歲以下成人腫瘤死亡首位。據(jù)統(tǒng)計(jì),在發(fā)病率最高的西歐、北美白種人中白血病年死亡率為3.2~7.4/10萬(wàn)人口;發(fā)病率低的亞洲、南美洲地區(qū)年死亡率為2.8~4.5/10萬(wàn)人口。我國(guó)年發(fā)病率與死亡率為2~4/10萬(wàn)人口,與歐美等國(guó)的類型分布有較明顯的差別。在白血病的診療中,對(duì)白血病進(jìn)行分型成為關(guān)鍵,不同類型的白血病其診療方案不同,療效及預(yù)后也不同。80年代以前白血病的

2、分型主要參照FAB分型標(biāo)準(zhǔn),采用細(xì)胞形態(tài)學(xué)和組化染色等手段。隨著CD的抗體不斷被國(guó)際協(xié)作組確認(rèn),MICM分型已成為當(dāng)今白血病診斷分型、預(yù)后判斷和殘留病變檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)。目前臨床上進(jìn)行白血病的免疫分型主要是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)及免疫組化技術(shù),其分型受到標(biāo)本量、價(jià)格、程序等的限制,而且一次實(shí)驗(yàn)只能分析1~4個(gè)表面抗原,漏掉了大量監(jiān)測(cè)機(jī)體免疫狀態(tài)的表面抗原指標(biāo)。隨著生物芯片技術(shù)的發(fā)展,學(xué)者們開(kāi)始應(yīng)用這種高通量、并行性、集成化的技術(shù)平臺(tái)進(jìn)行白血病的免疫分

3、型研究。本實(shí)驗(yàn)在前人的基礎(chǔ)上對(duì)應(yīng)用于急性白血病免疫分型診斷的細(xì)胞芯片進(jìn)行深入研究,對(duì)急性白血病患者的骨髓樣本進(jìn)行免疫分型,從而快速診斷白血病的類型。實(shí)現(xiàn)為臨床診斷提供快速、簡(jiǎn)便、完整的免疫學(xué)資料。
  方法
  1.將單克隆抗體點(diǎn)在醛基玻片上,細(xì)胞懸液滴于細(xì)胞芯片,那些有相應(yīng)CD抗原的細(xì)胞只能與相應(yīng)的單克隆抗體的點(diǎn)結(jié)合,進(jìn)行Wright's染色。
  2.對(duì)65例臨床白血病骨髓標(biāo)本進(jìn)行分型并驗(yàn)證結(jié)果。
  結(jié)果<

4、br>  1.65例臨床標(biāo)本的細(xì)胞芯片免疫學(xué)分型結(jié)果:52例AML(ANLL):48例表達(dá)CD13(92.31%),33例表達(dá)CD33(63.46%),18例表達(dá)CD15,42例表達(dá)HLA-DR;8例B-ALL:8例表達(dá)CD79(100%),7例表達(dá)CD19(87.5%)和HLA-DR,7例表達(dá)CD10(87.5%),5例表達(dá)CD20(62.5%),5例表達(dá)CD22(62.5%),;5例T-ALL:5例表達(dá)CD3(100%),5例表達(dá)C

5、D7(100%),4例表達(dá)CD2(80%)。
  2.流式細(xì)胞儀對(duì)65例臨床樣本的免疫分型結(jié)果:急性髓細(xì)胞白血病主要表達(dá)CD13(94.23%)、CD33(69.23%);B系A(chǔ)LL高表達(dá)CD79(100%),CD19(87.5%),CD10(75.0%);T系A(chǔ)LL中CD2,CD3,CD7均為100%表達(dá)。
  3.經(jīng)Wright's染色后,顯微鏡下進(jìn)行白血病細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析,65例臨床標(biāo)本的FAB分型結(jié)果:M14例,M21

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