裙帶菜多糖的分析純化及對A549腫瘤細胞凋亡的誘導.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、多糖是一種天然的大分子化合物,是由醛糖和(或)酮糖通過糖苷鍵連接成的聚合物。多糖是構成生物組織的重要成分,在細胞分化、識別、復制等方面發(fā)揮著重要的作用。海藻多糖(Seaweed Polysaccharide)即指海藻中所含的各種高分子碳水化合物,是一類多組份混合物,為水溶性,一般具有高粘度或凝固能力。褐藻多糖包括褐藻糖膠、褐藻淀粉和褐藻多糖,國內(nèi)外實驗證明褐藻糖膠(L-巖藻糖-4-硫酸酯)具有較強的生物學活性,不僅有免疫促進和抗病毒作用

2、,而且還具有抗氧化作用和抗腫瘤活性等。大連地區(qū)裙帶菜資源極為豐富,是當?shù)爻R姷氖秤煤T?,而且價格低廉,具有明顯的地域優(yōu)勢。 細胞凋亡是廣泛存在于組織細胞的基本生物學現(xiàn)象,是對不同有害刺激或疾病的一種特殊的細胞自殺行為。通過這種細胞自殺行為,機體消除損傷、衰老、突變的細胞,以維持生理平衡。腫瘤細胞的凋亡調(diào)控過程的失調(diào)所導致的細胞凋亡抑制是腫瘤發(fā)生的主要原因之一,在腫瘤細胞中,幾乎所有凋亡相關蛋白的表達與腫瘤都存在聯(lián)系。 本

3、論文從裙帶菜多糖的提取純化分離入手,采用優(yōu)化了的多糖的提取條件,并且初步分析了多糖組分,進一步將多糖作用于肺癌A549細胞系,檢測作用后腫瘤細胞的凋亡情況。結(jié)果顯示:1)多糖的提取方法:水提醇沉方法簡便易行,適于大批量生產(chǎn),有效的摒除了褐藻膠和褐藻淀粉的成分,其中最適的條件是溫度為90℃,時間為5小時,提取的多糖純度達到90%,其中采用了Sevage與酶結(jié)合的除蛋白方法,作用后的多糖產(chǎn)物在紫外分光光度計上260-300nm范圍內(nèi)掃描沒有

4、明顯的吸收峰;2)經(jīng)DEAE Cellulose-52和Sephadex G-100層析分析,苯酚-硫酸法顯色檢測,提取的裙帶菜多糖的主要組分為三種,而且三種組分都沒有拖尾現(xiàn)象,為三種單一的組分;3)將不同濃度的裙帶菜多糖作用于腫瘤細胞,經(jīng)過MTT實驗和流式細胞術檢測證明,多糖對腫瘤細胞的存活率有顯著的抑制作用,與對照組存在差異明顯,多糖能夠誘導腫瘤細胞的凋亡,并且與多糖的劑量濃度及作用時間有密切的依賴關系;4)多糖能夠下調(diào)凋亡調(diào)控蛋白

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