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文檔簡介
1、硫代葡萄糖苷是次生代謝產物,主要存在于雙子葉被子植物中。硫代葡萄糖苷可作為抗微生物制劑、殺蟲劑和天然熏蒸消毒劑,異硫氰酸酯是其多種降解產物中的一種。異硫氰酸酯除具有強烈的辛辣氣味可作為調味品外,還具有抗病毒、抑菌和抗癌活性,能夠有效的防止飲食中如雜環(huán)胺、多環(huán)芳烴和亞硝胺等多種致癌物所引起的DNA損傷和癌癥。因此,硫甙的研究吸引了眾多食品化學、醫(yī)藥和生物學家的興趣。本文則主要對硫代葡萄糖苷glucoraphanin的生物降解及其降解產物萊
2、菔硫烷的穩(wěn)定性及中藥萊菔子中glucoraphenin的生物轉化工藝進行研究。
首先對本實驗室32株菌株對硫代葡萄糖苷glucoraphanin和glucoraphenin的生物轉化能力進行篩選。結果表明,共有25種菌株對glucoraphanin具有降解能力,其中鏈格孢、柱孢對glucoraphanin的降解能力比較強4種菌株對glucoraphenin具有還原能力,其中束梗頭孢對glucoraphanin的降解能力比較
3、強。
其次,采用單因素實驗法通過動態(tài)研究,每60mL菌絲懸浮液中加入20mg/L底物,在25℃、160rpm的條件下轉化96小時為最佳條件,培養(yǎng)基中的葡萄糖濃度控制在1%。另外,通過對靜息細胞培養(yǎng)對glucoraphanin降解條件的研究表明,該反應的最適pH在6.5-7.5之間。
采用單因素實驗法對可能影響glucoraphenin轉化率的因素進行研究,確定轉化的最佳時間為給藥后96小時,pH6-8,加藥量
4、為40μg/mL。采用液相色譜、紫外掃描、液質連用技術對轉化產物進行初步鑒定,從鑒定結果分析,轉化產物為目標產物glucoraphanin。
另外本文利用自制的高純度萊菔硫烷,采用HPLC測定萊菔硫烷的含量,考察了不同溫度、光照、空氣中的氧氣和不同的包裝材料對萊菔硫烷油狀原液穩(wěn)定性的影響,以確定其最適保存條件。實驗表明高溫加熱時間較長萊菔硫烷含量會出現明顯降低,降解產物含量增加。萊菔硫烷對熱不穩(wěn)定,隨溫度升高或加熱時間的延
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