GOLPH3在卵巢癌組織中的表達及作用機制的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景
  卵巢癌(ovarian carcinoma,OC)是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤,早期不易發(fā)現(xiàn),一旦發(fā)現(xiàn)常常已屬晚期。上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer,EOC)是卵巢癌中最常見的一種類型,是婦科腫瘤中死亡率最高的一種類型。目前卵巢癌的常規(guī)治療仍然是手術(shù)、化療、放療和內(nèi)分泌治療等措施,但這些治療方法都存在著療效不佳的問題。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,腫瘤分子的靶向治療成為眾多學(xué)者關(guān)注的熱點,基因干擾

2、技術(shù)正逐步用于目的基因及相關(guān)基因的作用機制的研究。高爾基體磷蛋白3(GOLPH3)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種癌基因,在多種實體腫瘤中存在過表達,并與腫瘤的臨床分期、腫瘤病理分級及轉(zhuǎn)移侵襲密切相關(guān)。GOLPH3在多種生物學(xué)過程中發(fā)揮作用,參與多種惡性腫瘤的發(fā)展過程,其高表達多與不良的臨床預(yù)后有關(guān),而GOLPH3在卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展中的作用機制目前還不清楚。
  目的
  本課題旨在研究GOLPH3在卵巢漿液性囊腺癌組織中的表達及其與臨

3、床病理特征之間的關(guān)系,并利用基因干擾技術(shù)初步探討GOLPH3在卵巢癌細胞生物學(xué)行為方面的的作用機制,闡明GOLPH3在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。
  方法
  1.應(yīng)用實時熒光定量PCR、蛋白印記法(Western blot)分別檢測各組織標(biāo)本中GOLPH3在mRNA和蛋白水平的表達,并與患者臨床病理特征進行相關(guān)性分析。
  2.構(gòu)建針對人GOLPH3基因的shRNA表達質(zhì)粒(GOLPH3-shRNA),轉(zhuǎn)染人卵巢

4、癌SW626細胞系,使GOLPH3基因沉默。
  3.利用CCK-8、細胞克隆形成實驗及Transwell小室法檢測GOLPH3-shRNA轉(zhuǎn)染后對SW626細胞增殖、遷移及侵襲能力的影響。
  結(jié)果
  1.GOLPH3 mRNA在卵巢漿液性囊腺癌組織中的表達高于卵巢囊腺瘤組(2.33-7.34倍),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。GOLPH3蛋白在卵巢漿液性囊腺癌組織中陽性表達率(73.8%)明顯高于卵巢囊腺瘤

5、組(35.71%)(P<0.01),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
  2.GOLPH3蛋白陽性表達與漿液性囊腺癌的臨床分期(p=0.019)、病理分級(p=0.042)及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(p=0.000)有關(guān),而與患者的年齡(p=0.881)無關(guān)(P>0.05);并且腫瘤細胞的分化程度越低其GOLPH3蛋白表達量越高(P<0.01),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
  3.細胞實驗中干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染48小時后SW626細胞的轉(zhuǎn)染效率約為75%,干擾

6、組的GOLPH3的mRNA及蛋白表達水平的表達均明顯下調(diào)(P<0.01),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
  4.干擾組腫瘤細胞的增殖能力受抑制(P<0.01),且這種抑制作用與時間無關(guān);卵巢癌腫瘤細胞的克隆形成能力降低(P<0.01);卵巢癌腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移及侵襲能力亦明顯降低(P<0.01),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
  結(jié)論
  1.GOLPH3在卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。
  2.GOLPG3促進卵

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